【摘 要】
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石英粉尘是我国最常见的职业性有害因素之一,石英粉尘吸入后,经呼吸道进入肺部,巨噬细胞作为机体防护的第一道屏障,被石英粉尘刺激,从而启动一系列的免疫防御反应。三碘甲腺原氨酸（T3）是一种内分泌激素,能够调节机体的固有免疫反应,甲状腺激素受体α（TRα）作为三碘甲腺原氨酸的核受体,主要与三碘甲腺原氨酸结合后发挥抗氧化、抗炎和抗凋亡的生物学功能,然而,在目前的研究中,三碘甲腺原氨酸在石英粉尘导致的氧化应
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石英粉尘是我国最常见的职业性有害因素之一,石英粉尘吸入后,经呼吸道进入肺部,巨噬细胞作为机体防护的第一道屏障,被石英粉尘刺激,从而启动一系列的免疫防御反应。三碘甲腺原氨酸（T3）是一种内分泌激素,能够调节机体的固有免疫反应,甲状腺激素受体α（TRα）作为三碘甲腺原氨酸的核受体,主要与三碘甲腺原氨酸结合后发挥抗氧化、抗炎和抗凋亡的生物学功能,然而,在目前的研究中,三碘甲腺原氨酸在石英粉尘导致的氧化应激、炎性反应和凋亡中的调节作用及其机制尚未见报道。目的:研究三碘甲腺原氨酸（T3）在石英粉尘所致的巨噬细胞氧化应激、炎性反应和凋亡中的调节作用及机制。方法:石英粉尘采用德国标准石英（DQ12）,粒径为1μm,实验细胞采用佛波酯（PMA）诱导人单核THP-1分化成的巨噬细胞。在实验的第一部分,剂量分组采用0（对照）,50,100,200,400μg/ml浓度的石英粉尘染尘巨噬细胞24h。在实验的第二部分,400μg/ml石英粉尘染尘的同时,我们给予剂量（0,5,10,20,40n M）的T3补充组,甲状腺激素受体α（TRα）沉默组（特异性阻断T3/TRα通路）,以及空白对照组和单纯T3（40n M）对照组。最后,我们通过Cell counting kit-8试剂测定细胞活力,乳酸脱氢酶试剂盒测定上清液中的LDH,通过ROS和SOD试剂盒测定活性氧和超氧化物歧化酶水平,ELISA试验检测细胞上清液中炎性细胞因子的表达,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位（MMP）和细胞凋亡率,免疫荧光法测定凋亡因子Caspase-3和Cytochrome c的水平。结果:1.石英粉尘诱导巨噬细胞氧化损伤,炎性反应和凋亡。石英粉尘暴露后,与单纯空白组相比,巨噬细胞的细胞活力随染石英粉尘浓度的增加和时间延长而降低（P<0.05）,LDH,ROS,IL-1β,IL-6,TNF-α,Caspase-3和Cytochrome c随染石英粉尘浓度的增加而增加（P<0.05）,SOD和MMP随染石英粉尘浓度的增加而降低（P<0.05）,这部分的结果表明了石英粉尘引起巨噬细胞氧化应激、炎性反应水平升高和凋亡。2.T3/TRα抑制石英粉尘导致的细胞氧化损伤和炎性反应。补充一定剂量的T3后,与单纯石英染尘组相比,T3处理后的石英染尘组,细胞活力增加（P<0.05）,LDH和ROS降低（P<0.05）,SOD增加（P<0.05）,在炎性反应中,与单纯石英染尘组相比,T3处理后,炎性细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α表达水平降低（P<0.05）。此外,与空载病毒对照组相比,在TRα敲减组中,细胞活力降低（P<0.05）,LDH和ROS增加（P<0.05）,SOD降低（P<0.05）,IL-1β,IL-6,TNF-α表达水平升高（P<0.05）,这部分的结果表明了补充T3能够抑制石英粉尘引起的氧化应激和炎性反应,特异性阻断T3/TRα通路后,氧化应激和炎性反应水平升高。3.T3/TRα抑制石英粉尘导致的细胞凋亡。补充一定剂量的T3后,与单纯石英染尘组相比,T3处理后,细胞凋亡率降低（P<0.05）,线粒体膜电位升高（P<0.05）,Caspase-3和Cytochrome c的表达下降（P<0.05）,结果表明了补充T3能够抑制细胞凋亡的发生,此外,与空载病毒对照组相比,在TRα敲减组中,细胞凋亡率升高（P<0.05）,线粒体膜电位下降（P<0.05）,Caspase-3和Cytochrome c的表达增加（P<0.05）,结果表明了特异性阻断T3/TRα通路后,细胞凋亡水平升高。结论:石英粉尘可降低细胞活力,诱导氧化应激和炎性反应,启动凋亡进程。给予外源性三碘甲腺原氨酸（T3）可明显抑制石英粉尘所致巨噬细胞损伤和炎性反应,下调细胞凋亡进程;特异性阻断T3/TRα通路,可明显抑制T3在石英染尘巨噬细胞模型中的生物学作用。
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