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目的（1）探讨TLR7在Hela细胞中的表达（2）TLR7信号通路激活后对Hela细胞相关细胞因子、增殖、细胞周期的影响。方法（1）培养Hela细胞，采用荧光定量PCR（Real-time PCR）及Western Blot的方法分析TLR7在Hela细胞中的表达,同时用正常人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC）作为阳性对照。（2）Western-Blot分析Gardiquimod对Hela细胞丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶（MAPKs-ERK1/2）及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶（PI3K-AKT）蛋白磷酸化水平的影响,以及MAPKs-ERK1/2特异性阻断剂PD98059，PI3K-AKT特异性阻断剂LY294002阻断这两个信号通路，其磷酸化蛋白水平的变化。（3）通过Real-time PCR分析不同时间点Gardiquimod对Hela细胞下游VEGF，TIMP1，MMP2，IL-6，IL-15表达变化的影响，并通过特异性的信号通路阻断剂PD98059，LY294002分析下游的VEGF，TIMP1等表达的变化是否依赖上述MAPKs-ERK1/2及PI3K-AKT这两条信号通路的蛋白磷酸化水平的变化（。4）使用不同浓度的TLR7激动剂Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞，采用MTT比色法分析其对Hela细胞增殖的影响。（5）流式细胞技术检测Gardiquimod作用于Hela细胞后其细胞周期的变化。（6）Western-Blot分析Hela细胞中TLR7激活后,细胞周期蛋白B1（CyclinB1）及细胞周期蛋白E（CyclinE）表达的变化。结果（1）Real-time PCR及Western-Blot结果显示，与PBMC相比，TLR7在Hela细胞呈现组成性弱表达。（2）Western-Blot结果表明，Gardiquimod激活TLR7后可以显著增加Hela细胞中ERK1/2和AKT的蛋白磷酸化水平，特异性的阻断剂PD98059，LY294002研究显示，Gardiquimod依赖MAPK-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥其促进Hela细胞增殖的作用。（3）Real-time PCR分析，Gardiquimod经不同时间处理Hela细胞后，其下游VEGF,TIMP1，MMP2，IL-6，IL-15的表达都有不同程度的增加，并用上述特异性的信号阻断剂后，其下游VEGF等因子的表达呈现不同程度的降低。（4）MTT结果显示，TLR7激动剂Gardiquimod可促进Hela细胞的增殖，且呈时间及剂量效应。（5）流式细胞检测结果表明，TLR7配体促进Hela细胞的增殖。（6）Western-Blot结果显示，Gardiquimod可上调Hela细胞中CyclinB1和CyclinE蛋白的表达。结论Gardiquimod通过MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号通路诱导Hela细胞下游VEGF等因子的表达，并促进Hela细胞增殖。促增殖作用可能通过增加CyclinB1,CyclinE蛋白的表达。