论文部分内容阅读
目的通过建立间歇低氧模型,探讨间歇低氧对大鼠认知功能情况的影响;通过注入PI3K/AKT抑制剂及褪黑素,探讨PI3K/AKT信号通路及褪黑素对间歇低氧大鼠海马区神经元PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平及认知功能影响。方法选择成年雄性Wistar大鼠64只（体重170±10g）,随机分为4组:正常组（UC组）、间歇低氧组（IH组）、抑制剂组（PI3K组）及褪黑素组（MT组）,每组分为2W、4W、6W、8W四个时间亚组。抑制剂组及褪黑素组于每日晨起7:30于腹腔分别注入PI3K/AKT抑制剂GDC-0084（0.2mg/kg）及褪黑素ML221（10mg/kg）,注射30min后与IH组大鼠一起放入间歇低氧箱内,每日暴露时间为7h;正常组大鼠置于低氧箱内,持续给予21%氧浓度的空气。在2W、4W、6W、8W四个时间,采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能,每组随机处死4只大鼠,应用ELISA检测各组被处死大鼠海马组织及血清中氧化应激指标水平;免疫组织化及实时荧光定量PCR检测各组海马CA1区PI3K/AKT信号通路相关蛋白及核酸表达情况。结果1 Morris水迷宫结果:四组间大鼠逃避潜伏期、跨越目标象限时间百分比差异存在统计学意义(P组间<0.05),且抑制剂组逃避潜伏期时间>间歇低氧组>褪黑素组>正常组、抑制剂组跨越目标象限时间百分比<间歇低氧组<褪黑素组<正常组,且在间歇低氧8周内,随间歇低氧时间的延长,间歇低氧组、抑制剂组及褪黑素组大鼠逃避潜伏期延长、跨越目标象限时间百分比缩短(P时间<0.05),组间与时间存在交互作用(P交互<0.05)。2氧化应激检测结果:四组间大鼠海马组织ROS、MDA、SOD水平差异存在统计学意义(P组间<0.05),其中ROS、MDA水平>间歇低氧组>褪黑素组>正常组,而抑制剂组SOD水平<间歇低氧组<褪黑素组<正常组,且在间歇低氧8周内,随间歇低氧时间的延长,间歇低氧组、抑制剂组及褪黑素组大鼠海马组织ROS、MDA水平升高,SOD水平降低(P时间<0.05),组间与时间存在交互作用(P交互<0.05)。3大鼠海马神经细胞PI3K/AKT信号通路相关因子核酸及蛋白结果:四组间大鼠海马神经细胞PI3K、AKT、核酸及蛋白表达差异存在统计学意义(P组间<0.05),其中褪黑素组>间歇低氧组>抑制剂组>正常组,且在间歇低氧8周内,随间歇低氧时间的延长,间歇低氧组及褪黑素组大鼠海马神经细胞p-PI3K、p-Akt核酸及蛋白表达降低(P时间<0.05),组间与时间存在交互作用(P交互<0.05)。4大鼠海马神经细胞Nrf2、HO-1核酸及蛋白结果:四组间大鼠海马神经细胞Nrf2、HO-1核酸及蛋白表达差异存在统计学意义(P组间<0.05),其中褪黑素组>间歇低氧组>抑制剂组>正常组,且在间歇低氧8周内,随间歇低氧时间的延长,抑制剂组、间歇低氧组及褪黑素组大鼠海马神经细胞Nrf2、HO-1核酸及蛋白表达降低(P时间<0.05),组间与时间存在交互作用(P交互<0.05)。结论1间歇性低氧引起大鼠海马区发生氧化应激,激活PI3K/AKT信号通路,发挥抗氧化应激,改善大鼠认知功能2褪黑素可通过调控PI3K/AKT信号通路相关因子表达水平,发挥抗氧化应激、改善认知功能的作用。图17幅;表14个;参129篇。