目的:本课题以Aβ_25-35致伤PC12神经元细胞构建阿尔茨海默病模型,将外源表达（Brain Derived Neurophic Factor,BDNF）的神经干细胞诱导分化为神经元,然后和经过寡聚体Aβ_25-35致伤的PC12神经元共培养,观察在脑源性神经生长因子BDNF支持营养条件下共培养神经元的突触样连接是否可以拮抗Aβ_25-35诱导的神经损伤。方法:PC12细胞经神经生长因子（Nerve Growth Factor,NGF）诱导分化为神经元样细胞,然后分别用不同浓度的Aβ_25-35致伤PC12神经元样细胞不同时间,应用CCK8法检测细胞生存率,筛选早期阿尔茨海默病模型;免疫荧光染色法观察模型细胞PC12神经元的形态学变化;Western blot检测模型细胞PC12神经元中ERK1/2和PSD-95的表达变化;以腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP体外感染神经干细胞（Neural Stem Cells,NSCs）,筛选稳定表达BDNF、EGFP基因的神经干细胞与寡聚体Aβ_25-35致伤PC12神经元共培养,应用免疫染色法观察共培养后的突触共连接;应用实时荧光定量PCR、Western blot法检测对照组、模型组、BDNF-NSCs72h组、EGFP-NSCs72h组、BDNF-NSCs96h和EGFP-NSCs96h组各组PC12神经元中ERK1/2、PSD-95的mRNA和蛋白水平变化。结果:1.寡聚体Aβ_25-35能够降低PC12神经元细胞的存活率,并呈显著的剂量依赖性。其中5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L Aβ_25-35和对照组相比差异均有显著性（P﹤0.01）,以10μmol/LAβ_25-35作用PC12神经元48h凋亡率更为明显,20μmol/LAβ_25-35对细胞损伤更为严重。2.神经颗粒素与神经调节素的免疫荧光结果表明,PC12神经元细胞在10μmol/L Aβ_25-35干预48h后,形态学上出现明显神经毒性特征,突触长度变短、回缩。神经元胞体萎缩、突触网络彼此连接疏松。3.Western blot法进一步显示10μmol/L Aβ_25-35干预PC12神经元细胞48h后ERK1/2和PSD-95表达明显下降,与对照组相比差异有显著性（P﹤0.05）,故10μmol/L Aβ_25-35干预PC12神经元细胞48h可作为较理想的AD细胞模型。4.实时荧光定量PCR和Western blot均证明了感染BDNF的神经干细胞与模型组96h共培养后,神经干细胞诱导分化而来的神经元不仅与PC12形成突触共连接,对于寡聚体Aβ_25-35导致的PC12神经元损伤也具有良好的保护作用,与模型组相比,基因ERK1/2mRNA、PSD-95mRNA和蛋白ERK1/2、PSD-95表达量均明显升高（P﹤0.05,P﹤0.01）。5.免疫荧光进一步显示感染BDNF的神经干细胞与模型组96h共培养较72h组共培养突触连接更为紧密,同时分化的神经元突触分支更多,长度更长。结论:1.确定早期阿尔茨海默病模型的最佳有效浓度和时间为10μmol/L Aβ_25-35干预PC12神经元细胞48h。2.寡聚体Aβ_25-35对神经元的损伤毒性可导致神经元胞体萎缩、突触网络连接疏松、ERK1/2和PSD-95蛋白的表达减少。3.BDNF通过抑制寡聚体Aβ_25-35所致ERK1/2和PSD-95蛋白水平降低来发挥其突触修复及神经保护作用。