越来越多的证据表明原发性肝癌部分来源于转化的肝脏祖细胞(Hepatic Progenitor Cells,HPCs)。然而,目前对肝脏祖细胞转化的详细机制了解甚少。本研究揭示了乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)和转化生长因子β1(TGF-β1)与miR-199a-3p在肝脏祖细胞恶性转化中的作用及相互关联。我们发现在肝癌组织样本中HBx和TGF-β1的表达与肝癌干细胞标志物EpCAM和CD90的表达水平均呈正相关。重要的是,在HBx和TGF-β1均高表达的组织样本中,EpCAM和CD 90的表达水平均明显高于仅HBx或TGF-β1高表达或HBx和TGF-β1两者均低表达者,HBx和TGF-β1两者高表达与原发性肝癌预后不良密切相关。我们还发现,HBx可诱导肝脏祖细胞转化为肝癌干细胞,并促进其EMT的发生,TGF-β1可进一步增强肝脏祖细胞向肝癌干细胞的转化及EMT进程。此外,JNK/c-Jun通路的激活参与肝脏祖细胞的恶性转化过程。另外研究发现,在HBx和TGF-β1的双重作用下,肝脏祖细胞内miR-199a-3p的表达水平明显上调,而抑制JNK/c-Jun通路的激活能够逆转miR-199a-3p水平的升高。进一步研究证实HBx和TGF-β1可以激活c-Jun的转录活性,而激活的c-Jun可以结合到miR-199a-3p的启动子区域促进其转录而导致miR-199a-3p的表达水平升高。最后,miR-199a-3p能够促进肝脏祖细胞的恶性转化。综上,我们的研究结果表明,TGF-β1与HBx协同作用,通过JNK/c-Jun/miR-199a-3p依赖的途径促进肝脏祖细胞向肝癌干细胞的恶性转化。这可能为针对肝脏祖细胞恶性转化来预防和治疗肝癌开辟了新的途径。