丙型肝炎病毒(HCV),隶属于黄病毒科,是直径约60nm的囊膜病毒,其基因组是一条长约9.6kb的单链RNA分子,由5’和3’非编码区以及一个大的开放阅读框组成。本研究中,我们从丙型肝炎病毒的蛋白质翻译和干扰素诱导的天然免疫因子两方面对病毒与宿主因子的相互作用进行了研究。HCV的蛋白质翻译是由其基因组5’-端具有特殊二级结构的内部核糖体进入序列(IRES)介导起始的。为了进一步了解IRES的功能,我们构建了可以转录一条编码两个荧光蛋白DsRed2和AG的双顺反子mRNA的质粒报告载体,在该双顺反子mRNA中,DsRed2和AG分别依赖5’-Cap结构和IRES进行翻译。将该载体导入Huh7.5.1和HEK293细胞,通过用流式细胞仪检测得到的每个细胞中AG/DsRed2的值来计算出HCV IRES的相对活性。为了与传统的检测HCV IRES活性的生物化学方法进行对比,我们构建了框架结构相似的双顺反子报告载体,其中分别用Renilla luciferase和Firefly luciferase替代了DsRed2和AG。用这两种报告体系,我们发现(1)HCV IRES中nt164从A突变为G能将其活性降低40％左右,(2)IFN-α对HCV IRES的作用呈细胞和序列特异性,(3)外源合成的靶向HCVIRES的micro-RNA能有效抑制基因的表达。该IRES的流式细胞研究体系可以用于研究HCV蛋白质翻译和筛选以IRES为靶点的新型抗病毒药物。　　 BST2是一种天然免疫中的抑制因子。已有研究表明BST2对HIV-I,Ebola,Marburg等从细胞膜芽出的囊膜病毒均有抑制作用。我们发现:干扰素alpha能诱导BST2在HCV病毒许可性细胞Huh7.5.1中表达,并且BST2对非细胞膜芽出的囊膜病毒HCV有显著抑制作用。与已报道的BST2通过直接拴住囊膜病毒而抑制其从细胞膜释放不同的是,我们发现BST2抑制了HCV RNA的复制,抑制效率高达90%。而使用全病毒来研究BST2对HCV的抑制作用,最高可抑制60%。通过免疫荧光我们发现,过表达的BST2不仅定位在细胞膜上,还定位在与HCV RNA复制密切相关的ER上,同时也跟病毒一些非结构蛋白共定位。因此我们推测,BST2可能通过阻碍ER重构形成病毒的复制场所membranousweb,或者阻碍复制复合物的形成,使其基因组RNA复制受阻来抑制HCV,而在病毒的core,E1,E2,p7中可能存在着BST2的拮抗蛋白。