论文部分内容阅读
目的观察五子降糖方对2型糖尿病（T2DM）大鼠血糖的影响及对胰岛素抵抗（IR）的改善作用，进而探讨该方改善IR的作用机制。方法高脂饮食喂养联合腹腔注射小剂量链尿佐菌素建立T2DM大鼠模型，随机分为模型组，二甲双胍组，五子降糖方低、中、高剂量组，另设正常组。模型组、正常组大鼠分别灌胃（ig）纯净水，其他各组大鼠分别ig相应药物，干预6周。观察给药前后各组大鼠的一般情况，进行口服糖耐量试验以评估大鼠的血糖调节功能。实验结束时，腹主动脉采血，离心留取血清，ELISA法检测大鼠血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、超敏C反应蛋白（hsCRP）、C肽（C-P）的水平。通过Homa-IR （CP）公式计算T2DM大鼠终末期胰岛素抵抗指数。留取大鼠肝脏、肌肉组织，液氮保存，通过糖原测定试剂盒测定肝脏组织糖原含量；Western Blot检测骨骼肌组织中胰岛素受体底物1（IRS-1）、p-IRS-1（Tyr895）、蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）、葡萄糖转运体4（GLUT4）蛋白的表达及肝脏组织中蛋白激酶B（AKT）、p-AKT、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、p-GSK-3β蛋白的表达。结果1与正常组比较，模型组大鼠精神萎靡，饮食量增多，尿量增多，大便稀溏，毛发枯乱不泽，活动减少，反应迟钝；与模型组比较，五子降糖方组大鼠上述情况均明显好转。2与正常组比较，模型组大鼠空腹及餐后2h血糖水平升高，胰岛素抵抗指数升高（P<0.05）；与模型组比较，五子降糖方组大鼠空腹及餐后2h血糖水平降低，胰岛素抵抗指数降低（P<0.05）。3与正常组比较，模型组大鼠血清MDA、hsCRP水平升高，SOD水平降低（P<0.05）；与模型组比较，五子降糖方组大鼠血清MDA水平降低，SOD水平升高，其中该方中剂量组大鼠血清hsCRP水平降低（P<0.05）。4与正常组比较，模型组大鼠骨骼肌p-IRS-1（Tyr895）蛋白含量降低，IRS-1酪氨酸（Tyr895位点）磷酸化水平明显降低，PTP1B蛋白含量升高，GLUT4蛋白含量降低（P<0.05）；与模型组比较，五子降糖方组大鼠骨骼肌p-IRS-1（Tyr895）蛋白含量升高，IRS-1酪氨酸（Tyr895位点）磷酸化水平明显升高，PTP1B蛋白含量降低，GLUT4蛋白含量升高（P<0.05）。5与正常组比较，模型组大鼠肝糖原含量显著降低；肝组织AKT蛋白含量下降，其Ser473位点磷酸化水平降低；肝组织GSK-3β蛋白含量明显升高，其Ser9位点磷酸化水平降低（P<0.05）。与模型组比较，五子降糖方组大鼠肝糖原含量增加；肝组织AKT蛋白含量及Ser473位点磷酸化水平升高；肝组织GSK-3β蛋白含量较模型组降低，且其Ser9位点磷酸化水平升高（P<0.05）。结论1五子降糖方可降低T2DM大鼠空腹血糖及餐后血糖，改善其糖耐量；2五子降糖方可减轻T2DM大鼠体内氧化应激及炎症反应，改善胰岛素抵抗；3五子降糖方改善T2DM大鼠胰岛素抵抗的作用机制与降低骨骼肌PTP1B蛋白含量、提高IRS-1酪氨酸磷酸化水平及GLUT4蛋白含量有关；4五子降糖方改善T2DM大鼠胰岛素抵抗的作用机制与增加肝脏糖原含量，提高肝脏AKT及GSK-3β丝氨酸位点磷酸化水平有关。