冬枣核类黄酮的提取工艺研究及其生物功能初探

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红枣(Zizyhpus Jujuba dates)是鼠李科枣属植物枣树(Zizyhpus Jujuba Mill)的果实,是我国特有的果品之一,富含维生素、矿物质等多种营养素及环磷酸腺苷(cAMP)、齐墩果酸等生物活性物质。本试验利用冬枣核为试验材料,进行冬枣核类黄酮的提取分离研究,并对其抗氧化、抗肿瘤生物功能进行了初步探讨,以期为红枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考。因此,开展本课题的研究,为丰富食品科学知识及促进红枣产业化发展均具有重要的意义。 主要试验结果如下: 1.乙醇提取及超声波辅助提取是提取冬枣核类黄酮的理想方法。乙醇提取冬枣核类黄酮的最佳工艺参数为:乙醇浓度60%、料液比1:20、提取温度80℃、提取时间2h、提取次数二次,冬枣核类黄酮的提取量为1321.75mg/100g。超声波辅助提取冬枣核类黄酮最佳工艺参数为:60%乙醇、料液比1:20、超声温度80℃、超声波功率250W、提取时间60min、提取次数二次,冬枣核类黄酮的提取量为1344.81mg/100g。NaOH提取和纤维素酶提取冬枣核类黄酮不能达到良好的提取效果。 2.大孔吸附树脂AB-8对冬枣核类黄酮具有较好的吸附和解吸能力,是一种适用于冬枣核类黄酮吸附分离的树脂。其纯化冬枣核类黄酮工艺参数为:样液浓度0.1-0.5mg/mL、pH值4.5、流速1mL/min、洗脱剂60%乙醇水溶液、洗脱剂用量3.5BV。经该工艺得到的冬枣核类黄酮的纯度为26.2%。 3.冬枣核类黄酮具有体外抗氧化活性。冬枣核类黄酮能够有效清除DPPH和超氧阴离子自由基,对DPPH和超氧阴离子自由基的清除率随着浓度的升高,清除能力逐渐增强。在5-25μg/mL浓度范围内,对DPPH自由基的清除率为42.7-81.1%,其IC50为6.5μg/mL。在20-120μg/mL浓度范围内,对超氧阴离子自由基的清除率为5.3-77.2%,其IC60为78.0μg/mL。冬枣核类黄酮对DPPH和超氧阴离子自由基清除率具量效关系。 4.冬枣核类黄酮具有抗肿瘤活性。MTT试验表明,冬枣核类黄酮可不同程度的抑制鼠脑胶质瘤C6和人胃癌MKN—45细胞的生长,且呈明显的剂量依赖性,随着剂量的增加,抗肿瘤作用增强。冬枣核类黄酮和抗癌化疗药物MTX联合用药具有协同效应,可增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,减少化疗药物的使用剂量。
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