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目的:
通过对HCV抗体ELISA筛查呈有反应性标本进行RIBA确证,分析ELISA反应性强度与确证结果间的关系,探讨利用ELISA检测值/临界值(S/CO比值)进行献血者管理的可行性。对Q-PCR结果为阳性的标本进行E1和NS5B区测序,了解本地区无偿献血人群感染的HCV基因型分布特点。
方法:
1.用第3代重组免疫印迹法(RIBA3.0)对78份ELISA检测呈反应性的标本进行确证实验,其中珠海丽珠试剂有限公司第3代抗-HCV抗体ELISA试剂检测呈反应性标本26份,美国强生公司Ortho HCV Version3.0试剂检测呈反应性标本33份,以及2种试剂均为反应性标本19份；
2.采用Q-PCR对19份2种试剂均为反应性的标本进行病毒核酸检测；
3.对Q-PCR检测为阳性的标本进行HCV E1和NS5B区进行基因扩增,然后通过核苷酸序列测定确定其基因型。
结果:
1.59份单种试剂检测呈反应性标本的确证结果为阴性31份,不确定28份,2种试剂检测均为反应性的19份标本中,确证阳性16份,确证阴性1份,不确定2份,确证阳性标本的S/CO值明显高于不确定和阴性标本；
2.19份2种ELISA试剂均为反应性的标本中16份Q-PCR结果为阳性,1份可疑,2份为阴性;
3.通过对15份Q-PCR结果阳性的标本进行E1和NS5B区进行基因扩增,测序并分型,结果为:1b[(6/15)40％],6a[(5/15)33.33％],3a[(2/15)13.33％],2a[(1/15]6.67％],1a[(1/15)6.67％]。
结论:
1.2种试剂检测均为反应性与RIBA确证阳性结果有较高的符合性,2种试剂与确证检测结果间的符合性无明显差异,确证结果与确证的条带分布有关;
2.HCV抗体ELISA筛查反应性强度(S/CO比值高低)与确证结果关系密切,以此构建HCV抗体检测的献血者反馈策略可用于对献血者的管理;
3.在2种ELISA试剂均为反应性的标本中,RIBA与Q-PCR检测结果符合性高,本地区无偿献血人群HCV感染的基因型主要以1b和6a为主。