牡蛎提取物中营养成分的分析及有效部位筛选

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本论文内容主要包括牡蛎及其提取物的营养分析和牡蛎有效部位的活性筛选两部分。第一部分,牡蛎及其提取物的营养分析。新鲜牡蛎肉在室温下加水提取,过滤后继续加入3%醋酸溶液提取。对牡蛎肉及其提物液Oy0、Oy1、Oy2进行营养分析,实验结果显示Oy1、Oy2中蛋白质含量较高,分别为33%和53%,氨基酸种类丰富,其中以3%稀醋酸为提取液所得的蛋白质和氨基酸含量较高。将提取液Oy0、Oy1、Oy2用乙醇分级沉淀,经紫外扫描后合并谱图相似的组分,并标记为A-H。对乙醇沉淀后的剩余物进行营养分析,结果表明Oy0′中K、Mg、Ca、Zn等元素含量丰富,Oy1′中含有丰富的K、Mg、Ca、Cu、Fe、Zn、Ni等元素,Oy2′中K、Mg、Ca、Mn、Zn等元素含量较高。经正常小鼠餐后血糖实验筛选发现组分B、D、F有降糖活性,对其进行氨基酸和糖原含量检测,结果表明组分B的主要成分为蛋白质和糖原,组分D的主要成分为蛋白质,组分F中糖原、蛋白质、无机盐含量较高,由此可见它们发挥生理活性可能为其中一种成分起作用或几者成分的相互作用。第二部分,牡蛎有效部位的活性筛选。建立动物实验模型,给予不同部位的牡蛎提取物,通过指标检测及脏器病理切片观察,探讨牡蛎提取物的治疗效果,筛选有效活性部位。1.降血糖实验(1)对组分A、B、C、D、E、F通过正常小鼠餐后血糖实验进行筛选,实验结果表明组分B、D、F在200mg/kg时对正常小鼠餐后30min内的血糖有一定的抑制作用。(2)通过腹腔注射四氧嘧啶溶液诱导高血糖模型小鼠,给予模型小鼠高、低剂量的组分B、D、F(各600mg/kg、400mg/kg)和阳性药优降糖(100mg/kg),持续3周。检测各组2周及3周后小鼠空腹血糖,发现B低剂量(400mg/kg)能明显降低模型小鼠血糖,且具有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,B低剂量组(400mg/kg)的肝体比、肾体比均明显降低(P<0.01),但脾体比无显著性差异,表明牡蛎提取物组分B具有一定的保肝功能,并对肾脏功能有一定的促进作用;观察胰腺病理切片,发现B低剂量(400mg/kg)对β细胞有一定的恢复和保护作用,并对胰岛有一定的修复作用。2.降血脂实验喂食特殊加工的高脂饲料12周建立高血脂症大鼠模型,建模成功后给予模型大鼠组分B、D、F、G(均400mg/kg)和阳性药辛伐他汀(1mg/kg)。灌胃5周后检测血脂四项指标,计算脏器指数,并制备肝脏病理切片。实验结果显示,B组及辛伐他汀组与模型组比较,指标TG具有显著性差异(P<0.05),且分别下降了35.2%及44.4%;B组能轻度减轻大鼠肝脏的重量,但是对肾脏、脾脏重量变化无影响;观察肝脏病理切片,B组胞质内脂肪空泡的数量相对于模型组有一定的减少,介于模型组与阳性组之间,表明组分B能够降低高血脂症大鼠血浆中TG水平并对肝脏的脂肪病变有一定的治疗作用。3.酒精性肝损伤实验灌胃56度白酒(12mL/kg/d)建立酒精性肝损伤模型,预防中剂量组给予组分F(300mg/kg),建模7周后分别给予组分F高、中、低剂量(450mg/kg、300mg/kg、150mg/kg)和阳性药多烯磷脂酰胆碱(50mg/kg)。5周后检测血清指标,计算脏器指数,并制备肝脏病理切片。实验结果显示,血脂指标TG,F治疗中剂量组(300mg/kg)在灌胃后,与模型组相比具有极显著性差异(P<0.01),且下降49.2%;,F预防中剂量组(300mg/kg)在灌胃前后,与模型组相比均有显著性差异((P<0.01),且分别下降53.8%、57.5%;其他指标未见明显影响。表明F中剂量(300mg/kg)对酒精性大鼠肝脏初期TG含量的升高有很好的预防和治疗作用,效果较好。
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