高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)具有高压、高效、高速、高灵敏度、操作简单等优点。现如今,高效液相色谱法在中草药、食品卫生、生物工程、环境安全和石油化工等多方面均具有广泛的应用。高效液相色谱法分离的基本原理是利用流动相对分析成分洗脱过程中,各个组分在固定相上的保留时间不一致从而达到分离的效果。在实际应用检测过程中,分析物在经高效液相色谱分析检测前必须经过严格的前处理过程,以达到有效萃取分析成分、富集痕量组分的目的,样品前处理的好坏决定了检测的灵敏度和准确性。为了实现实验数据更加精准,各种样品前处理方法以应运而生。如何让前处理方法变得更加绿色、快速、简单成为广大化学研究者一直努力的方向。本文由两部分构成:绪论部分和研究报告。第一部分简单论述了高效液相色谱法、中草药、黄酮、有机酸成分以及部分样品前处理的发展和应用情况。第二部分研究报告中反应了利用高效液相色谱法建立的几种针对不同中草药成分中的黄酮和有机酸成分的分析方法。1.高效液相色谱法同时测定仙鹤草中6种黄酮建立超声辅助萃取-高效液相色谱法分离仙鹤草中芦丁、花旗松素、香豆素、木犀草素、山奈酚和芹菜素6种黄酮及其含量测定的方法。采用Phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离6种成分;流动相为甲醇-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱;流速0.8 m L/min,紫外检测波长320 nm,柱温35℃。6种成分在15 min内均达到基线分离,线性关系良好(r>0.999 1,n=6),平均回收率均在97.78%~104.4%(RSD<1.20%,n=3)。结论:本实验采用超声波法提取,方法简单、快速、经济、可靠,可用于仙鹤草的质量监控。2.HPLC测定香椿中的有机酸和黄酮等7种活性成分以超声辅助萃取为前处理方式,建立了高效液相色谱法对香椿中表儿茶素、没食子酸、儿茶素、芦丁、杨梅素、槲皮素和山奈酚7种活性成分进行定性、定量分析的方法。采用Phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)对7种成分进行分离检测;流动相采用甲醇-0.1%乙酸溶液;在紫外波长290 nm下,以0.8 m L﹒min-1为流速,柱温恒定为35℃。回收率范围保持在99.23%~104.5%(RSD%<1.26%,n=3)。本实验前处理选择超声波法萃取,操作方法简单有效,实验数据真实可靠,为香椿的进一步研究提供理论依据。3.HPLC法同时测定紫花地丁中6种活性成分建立超声辅助萃取-高效液相色谱法分离和测定紫花地丁中秦皮乙素、咖啡酸、芦丁、柚皮素、木犀草素和芹菜素6种活性成分的方法。采用Phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离6种活性成分;流动相:甲醇-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱;流速:0.8 m L﹒min-1,紫外检测波长:340 nm,柱温:35℃。6种成分在15 min内均达到基线分离,线性关系良好(r>0.9991,n=8),平均回收率范围:102.13%~104.55%(RSD%<1.20%,n=3)。本实验采用甲醇-超声波法提取,方法简单、快速、经济、数据可靠。4.离子液体辅助萃取—高效液相法测定6种草药中的6种活性成分以离子液体超声辅助萃取为前处理方式,以高效液相色谱法分离艾叶、车前草、鱼腥草、荆芥、半枝莲、蒲公英6种药店中常见的中草药中咖啡鞣酸、芸香甙、槲皮素、木樨草素、山奈酚和芹菜素6种有效成分,并对其进行定量定性分析。采用Phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离6种成分;高效液相仪器设置条件优化分别为:流动相:甲醇-0.1%乙酸溶液;流速:0.8 m L﹒min-1;紫外检测波长:290 nm;柱温:35℃。6种成分可在13 min内达到良好的基线分离,线性关系良(r>0.9991,n=3),平均回收率在99.68%~104.9%(RSD%<1.70%,n=3)。本实验采用离子液体辅助萃取法具有简单、快速、萃取效果良好等优点,可用于艾叶、车前草、鱼腥草、荆芥、半枝莲、蒲公英的质量监控。