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四环素类药物是兽医临床常用的一类抗生素，常用的品种有四环素、金霉素、土霉素、强力霉素，主要用于家畜和家禽各种疾病的治疗。随着这些药物的广泛应用，它们在动物性食品中的残留逐渐受到重视。在四环素类抗生素的残留检测方法中，免疫分析法以其特异性高、简单、灵敏、快捷的特点而被广泛应用。本研究采用重氮法在强力霉素（DC）和金霉素(CTC)分子上分别引入对氨基苯乙酸，合成了两种新的半抗原DC-C和CTC-C。用混合酸酐法将半抗原DC-C和载体蛋白偶联，制备了免疫原DC-C-BSA和包被原DC-C-OA。用同样的方法将半抗原CTC-C与载体蛋白偶连，制备了包被原CTC-C-OA。经紫外测定，免疫原DC-C-BSA的偶联比为19:1，包被原DC-C-OA的偶联比为15:1，包被原CTC-C-OA的偶联比为9:1。另外，将强力霉素与载体蛋白偶连，制备了免疫原DC-BSA和包被原DC-OA，偶联比分别为16:1和11:1。用两种免疫原分别免疫Balb/c小鼠，采用杂交瘤技术制备单克隆抗体，最终获得了两株分泌抗强力霉素的单克隆抗体的杂交瘤细胞。将获得的抗体和三种包被原两两组合成六种组合，通过优化筛选，确定了免疫原DC-C-BSA产生的抗体和包被原CTC-C-OA为最佳组合，建立了一种可以同时检测牛肉和牛奶中七种四环素类药物（强力霉素，四环素，金霉素，土霉素，米诺环素，美他环素，地美环素）残的间接竞争酶联免疫吸附法（ELISA）方法。在该方法中，包被抗原最适包被浓度为2.1μg/mL，单克隆抗体的最适工作浓度为1:10000。该方法对七种四环素类药物的交叉反应率为47%~102%，检测限为1.5~6.9ng/mL。七种药物在空白样品中的添加回收率为75.3%~106.8%，变异系数低于10.9%。因此，该ELISA方法快速、灵敏、方便，满足了四环素类残留检测的要求，适用于大批量样品的快速筛选检测。