目前,环境雌激素类污染物的检测与防治备受关注,但现有的检测方法大多需要昂贵的设备且检测程序冗长。本论文建立了一种检测环境雌激素类污染物的基因工程菌技术,以快速筛选大量环境样品中的雌激素类污染物,并定量评价其环境风险。首先,本文构建了一种对雌激素类物质敏感的大肠杆菌基因工程菌株。该菌株是将对雌激素敏感的蛋白质内含肽基因插入特定颜色蛋白基因内部,当样品中含雌激素时,内含肽的诱发剪切会产生有活性的颜色蛋白,使大肠杆菌呈现颜色,实现定性检测;反之,菌体无颜色。同时,颜色蛋白的活性与雌激素的含量呈一定的相关性,可实现定量分析。其次,已建立的环境雌激素类污染物的基因工程菌检测技术,对17β-雌二醇((o)estradiol-17β)标准品雌激素活性的检测限为ng级。由此表明:此方法对17β-雌二醇敏感,可以用来检测该类雌激素污染物。对双酚A (Bisphenol A,BPA)标准品的检测结果表明:此方法对BPA也具有明显的剂量效应关系。屈(chrysene)、芘(pyrene)和苯并(a)蒽(benz(a)anthracene)三种不同结构的多环芳烃的雌激素活性的检测结果显示:三种物质的雌激素活性差异明显,具有不同的检测限,以与17β-雌二醇结构相近的屈活性最大。推测工程菌雌激素活性与被检物分子结构之间具有一定的相关性,分子结构与17β-雌二醇越相近的污染物,其雌激素活性可能越强。对6OH-屈的检测结果表明:与屈相似,6OH-屈具有明显的剂量效应关系,说明工程菌雌激素活性的强弱与被检物的空间结构关系较大,而与取代基的关系不明显。利用分子对接研究中常用的DOCK软件初步分析了多环芳烃(PAHs)类物质结构与雌激素活性的关系。结果表明:分子空间结构确实与其雌激素活性有关,与17β-雌二醇空间结构越接近的物质,雌激素活性越强。最后,利用该菌株法对污水处理厂的污泥和水样提取液进行了雌激素活性的检测,同时与这些样品中的合成麝香类物质的浓度进行了对比。结果表明,颜色蛋白的活性与样品中的合成麝香类物质含量之间呈正相关关系。由此表明,该基因工程菌检测技术可快速有效地筛选与初步定量环境样品的雌激素活性。总之,本论文所建立的基因工程菌检测技术具有以下优点:操作简单,价格低廉,无需昂贵仪器;检测时间短,全程时间仅需2-3小时;稳定性高,可实现高通量的快速检测;灵敏性好,检测限低,可达到ng级水平,可定量检测环境样品的雌激素活性。此方法特别适用于大量样品的快速扫描,可实现对环境雌激素的生态风险评价,为构建我国水污染防治的技术评估体系提供支持。