【摘 要】
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目的:观察青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路的影响,探讨青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化的效果及其作用机制,并初步判断青光安有效组份缓释剂的安全性。方法:通过前期研究的高通量中药筛选体系,提取4种青光安有效组份,并将4种青光安有效组份制成缓释药膜。将48只健康成年新西兰长耳白兔,采用随机数字法分为8组,每组6只。分别为:A组:空白组;
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目的:观察青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路的影响,探讨青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化的效果及其作用机制,并初步判断青光安有效组份缓释剂的安全性。方法:通过前期研究的高通量中药筛选体系,提取4种青光安有效组份,并将4种青光安有效组份制成缓释药膜。将48只健康成年新西兰长耳白兔,采用随机数字法分为8组,每组6只。分别为:A组:空白组;B组:模型组;C组:MMC对照组;D组:有效组份1组;E组:有效组份2组;F组:有效组份3组;G组:有效组份4组;H组:安慰剂组。A组不做任何处理,将B、C、D、E、F、G、H七组实验动物兔眼行常规小梁切除+虹膜根部切除术;C组在术中联合应用MMC;D、E、F、G四组分别在结膜下植入相对应的青光安有效组份缓释药膜;H组在结膜下植入安慰剂缓释药膜。各组实验动物分别于术后测量眼压,观察滤过泡形态,检查术口愈合及眼部一般情况。用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子,剪取术眼滤过道巩膜组织,采用HE染色后观察滤过性手术区组织形态,采用Real-time PCR法和Western-blot法对滤过泡区域巩膜组织中TGF-β2、Smad3、Smad4和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白的表达进行检测,并进行统计学分析。结果:术后C、E两组眼压回升缓慢,第4周时该两组眼压值与A、B、D、F、G、H组眼压值比较P<0.05,差异均有统计学意义。C组和E组术后都能维持有效滤过泡,B组滤过泡在术后两周内基本都变为无功能滤过泡或滤过泡消失,D、F、G、H组在术后第4周都有少量功能性滤过泡存在。HE染色见C、E两组滤过道轮廓清晰,纤维细胞及炎症细胞少,其他各手术组滤过道轮廓消失,被大量纤维细胞和炎症细胞填充;术后四周各组TGF-β2的mRNA和蛋白的表达量,B、C、D、E、F、G、H各组比较P>0.05,差异无明显统计学意义;Smad3、Smad4的mRNA和蛋白的表达量,C组与B、D、E、F、G、H各组比较P<0.05,差异有明显统计学意义,而B、D、E、F、G、H各组比较P>0.05,差异无明显统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白的表达,C、E组与B、D、F、G、H各组比较P<0.05,差异有明显统计学意义,C、E组比较P>0.05,差异无明显统计学意义。结论:（1）验证了在进行青光眼滤过性手术后,滤过道的瘢痕化是导致滤过道堵塞,术后眼压回升,滤过泡失去功能,滤过性手术失败的重要原因;（2）MMC和青光安有效组份2都可以通过影响滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路来抑制成纤维细胞增殖和Ⅰ型胶原蛋白的表达,而减少瘢痕组织的增生,具有明显的抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用。（3）青光安有效组份2能够与TGF-β竞争性结合TGF-β受体,从而起到拮抗TGF-β的作用,使得TGF-β/Smad细胞信号传导通路的信号传导减弱,成纤维细胞合成分泌Collagen Ⅰ减少。（4）青光安有效组份2除了直接影响TGF-β/Smad细胞信号传导通路外,可能还能够通过影响炎症因子的生成,间接的减少炎症因子对手术区滤过道的影响,减少TGF-β的产生,从而影响TGF-β/Smad细胞信号传导通路。（5）通过实验我们观察到青光安有效组份2缓释剂局部给药的毒副作用小,安全性优于MMC。有望成为抗青光眼术后抑制滤过道瘢痕化,维持术后低眼压状态,提高手术成功率的一个新型的安全的药物。
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