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目的:流产是我国生育年龄妇女中常见的病理妊娠,一般报道其发病率为10-15%,但事实上根据我国目前的医疗与计划生育水平,在不同地区、阶层、年龄组统计流产发生率占所有妊娠的15-40%,其中约75%发生于16周以内,在12周以内的约占到流产总数的62%。多年来学者们对流产的发病原因做了大量的研究工作,目前已知的病因包括遗传缺陷、解剖异常、内分泌紊乱、感染、环境影响和免疫因素等,但迄今为止流产的发病机制还不完全清楚,故尚无理想的防治方法。由于胎盘本身缺乏自主神经,胎儿胎盘循环需要通过体液因子或自分泌、旁分泌机制调节,所以在母胎界面的血管活性物质和免疫因子很可能成为影响妊娠成功与否的关键因素。血红素氧合酶-1(HO-1)的适量表达及其代谢产物一氧化碳(CO)、胆绿素和二价亚铁离子(Fe<2+>)能够通过舒张血管、抗炎、抗凋亡以及免疫保护等方面的作用维护胎盘的正常功能,保证胎儿生长发育的需要。但流产患者绒毛组织中HO-1的表达与正常妊娠比较是否有明显差异,国内外尚无明确报道。本实验旨在研究正常妊娠与流产患者绒毛组织中HO-1的表达情况,以及HO-1的代谢产物血浆内源性CO在外周血的变化,同时通过细胞增殖核抗原(PCNA)研究早期流产绒毛组织中的细胞增殖情况,并探讨HO-1与PCNA可能的相关关系,以期为流产的防治提供实验依据。
方法:选取正常早孕妇女20例(对照组),并选择同期证实为难免流产或过期流产的妇女30例(实验组),于人工流产术时以无菌方式取绒毛组织经生理盐水冲洗后10%福尔马林固定,石蜡包埋,制成组织切片。术前以不加抗凝管分别采取对照组和实验组肘静脉血2ml,离心后取血浆置-70℃冰箱待测。应用免疫组化S-P染色法对两组绒毛组织HO-1的表达进行半定量分析;应用免疫组化S-P法测定两组绒毛的PCNA的表达;采用改良Chalmers联二亚硫酸盐法测定两组血浆中CO水平。资料均经SPSS12-0统计软件处理,计量资料用t检验,计数资料用X<2>检验,变量间进行相关分析,检验标准以P<0.05为差异有显著性。
结论:本实验首次研究了HO-1在早期自然流产患者绒毛组织中的表达,通过PCNA了解了流产后滋养细胞的增殖情况,同时探讨了HO-1与细胞增殖的相关性,得出以下结论:
1.正常妊娠女性绒毛组织中HO-1表达较强,在早期流产时HO-1表达减弱,提示HO-1对流产有一定作用,可能是妊娠成功的重要调节因素。诱导HO的表达在动物模型中治疗流产已取得明显效果,但应用于临床还有一定的距离,有关HO-c O系统和流产关系的研究将为临床防治流产提供新的思路和途径。
2.血浆中CO水平与绒毛组织HO-1表达之间呈正向相关性,HO-1在母胎界面表达下降,可引起血管舒张因子CO合成与释放减少,说明CO与H0-1在流产发病过程中协同发挥作用。
3.PCNA在两组绒毛组织中均有表达,其中实验组的表达强度较对照组明显下降,证明流产患者绒毛组织细胞增殖明显减弱。同时PCNA表达与HO-1的表达呈正向相关性,考虑HO-1通过增加胎盘绒毛血流供应,可以达到促进细胞增殖的效果,故PCNA可作为反映H0-1影响妊娠的细胞学指标。