长根菇胞外多糖对肠道微生态的影响及其抗氧化作用的研究

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长根菇(Oudemansiella radicata),隶属于担子菌门,伞菌纲,伞菌目,膨瑚菌科,小奥德蘑属,是一种珍贵的食药用真菌。研究发现,长根菇具有抗肿瘤、抗衰老、增强免疫力等功效。目前,对长根菇的研究主要集中于子实体,对长根菇胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的研究相对较少。因此,本文对长根菇液体发酵培养基成分进行了优化,提取了长根菇胞外多糖,并研究了长根菇胞外多糖抗氧化能力及对小鼠肠道菌群的调节作用,主要结果如下:(1)培养基条件的优化通过单因素试验筛选出最佳碳源为葡萄糖、最佳氮源为酵母膏;采用正交试验获得长根菇液体发酵培养基成分的最佳配比为:马铃薯250g/L,葡萄糖20g/L,酵母膏3g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4·7H2O 2.5g/L。在此条件下,EPS含量为2936.96 mg/L,是对照的3.4倍。(2)长根菇胞外多糖对小鼠肠道菌群的影响研究为了研究长根菇多糖对小鼠的肠道菌群及肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,SIgA)的影响,选取18-22g健康清洁级雄性昆明小鼠进行肠道菌群和SIg A的检测。利用盐酸林可霉素(Lincomycin Hydrochloride,LIH)灌胃建立肠道微生态失调小鼠模型。60只小鼠随机分为五组,分别是正常对照组、自然恢复组、低剂量多糖组(75mg/kg·bw)、中剂量多糖组(150mg/kg·bw)和高剂量多糖组(300mg/kg·bw)。灌胃14天后分别进行肠道双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌检测和肠黏膜SIgA测定。并运用Illumina高通量测序技术分析各组小鼠盲肠内容物中菌群结构。结果显示,与空白对照组比较,其余各组均有双歧杆菌、乳酸杆菌、SIg A减少以及大肠杆菌、肠球菌增多的现象;与自然恢复组比较,多糖组上述指标得到明显改善,差异显著(p<0.05)。空白对照组物种多样性最高,多糖组次之,自然恢复组最低。另外,有益菌与致病菌比例差异显著,多糖组有益菌群相对比例高于自然恢复组,而自然恢复组中致病菌相对比例最高。(3)长根菇胞外多糖抗氧化活性的研究体内试验测定了小鼠血液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果表明长根菇胞外多糖能够明显提高SOD活性,降低MDA含量,提高了机体的抗氧化能力。体外试验,以DPPH清除力、还原力和铁离子螯合能力为指标测定了EPS的体外抗氧化能力,进一步验证了长根菇胞外多糖的抗氧化能力。
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