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以自花授粉和异花授粉后‘琯溪蜜柚’(Citrus grandis)果实为材料,研究异花授粉对‘琯溪蜜柚’果实汁胞有机酸代谢产生的影响,为进一步揭示‘琯溪蜜柚’果实品质形成分子机理夯实基础。研究内容如下:1.测定和分析自花授粉和异花授粉‘琯溪蜜柚’果实中正常和粒化汁胞可溶性固形物、可滴定酸含量,以及柠檬酸、异柠檬酸和苹果酸等有机酸含量变化。结果表明:异花授粉提高可溶性固形物和可滴定酸含量;异花授粉后果实汁胞中柠檬酸、苹果酸含量有所升高,而异柠檬酸含量降低。粒化汁胞中的柠檬酸含量明显下降,异柠檬酸含量升高。2.测定自花授粉和异花授粉后‘琯溪蜜柚’果实有机酸代谢中苹果酸酶NADP-ME,苹果酸酶NAD-ME,柠檬酸合成酶CS,顺乌头酸酶ACO,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC,苹果酸脱氢酶NADP-MDH,苹果酸脱氢酶NAD-MDH,丙酮酸激酶PK,异柠檬酸脱氢酶NADP-IDH,异柠檬酸脱氢酶NAD-IDH和PEPP等11个酸代谢相关酶活性。异花授粉对‘琯溪蜜柚’果实汁胞CS、ACO、NAD-IDH、NADP-IDH、NAD-MDH、NADP-MDH、NAD-ME、 NADP-ME、PEPC、PK等10个与有机酸相关酶的活性影响较大。而仅仅对磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酶PEPP的影响较小。3.通过荧光定量PCR技术进行自花授粉和异花授粉后‘琯溪蜜柚’果实有机酸代谢中NADP-ME, NAD-ME, CS, ACO,PEPC, NADP-MDH, NAD-MDH, PK, NADP-IDH,NAD-IDH和PEPP的基因表达分析。结果显示:相对于自花授粉组合,异花授粉对果实正常汁胞有机酸代谢酶基因表达没有影响,在粒化汁胞中NADP-ME, NAD-ME, cyNAD-MDH,CS和ACO这5个基因的表达量都有增加,而NAD-IDH和NADP-IDH这两种基因的表达量减少;此外PEPC, PK和mMDH这三种基因的表达量都是没有差异。