Kupffer细胞在大鼠原位肝移植免疫调节中的作用

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目的 (1)通过建立大鼠原位肝移植急性排斥和免疫耐受动物模型,观察两组移植肝内kupffer细胞FasL分子表达及血液中细胞因子的变化。(2)观察两组移植肝内浸润淋巴细胞的凋亡情况以及Caspase-3的表达(3)分离出kupffer细胞,在体外观察kupffer细胞功能变化及对淋巴细胞的杀伤能力。通过上述研究,初步阐明kupffer细胞在大鼠原位肝移植免疫调节中的作用。 方法 (1)选用Wistar和SD大鼠,按“两袖套法”建立大鼠肝移植动物模型,将大鼠分为排斥组(Wistar→SD,A组)和耐受组(Wistar→Wistar,B组),并以正常肝脏作为对照(C组)。A、B组分别于术后3、5、7天杀取标本。(2)观察A、B组受鼠存活率,肝脏组织病理改变,测定血浆总胆红素(TBIL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及白蛋白(ALB)水平,测定血浆中细胞因子TNF-α、IL-10和TGF-β1的变化。观察肝组织中kupffer细胞FasL分子的表达,淋巴细胞凋亡情况及淋巴细胞Caspase-3的表达。(3)分离出C组以及A、B组术后7天移植肝内kupffer细胞,用流式细胞仪检测kupffer细胞FasL的表达。将kupffer细胞与增殖后的淋巴细胞共同培养,观察kupffer细胞对淋巴细胞的杀伤作用。 结果 (1)A、B两组大鼠原位肝移植主要手术步骤所需时间无明显差异。在未应用任何免疫抑制剂的情况下,A组大鼠术后出现典型的急性排斥反应,肝功能损害较重,血浆TBIL、AST、ALT等明显升高,ALB含量降低,大鼠平均存活9.4天。B组大鼠无明显排斥表现,肝组织仅发生
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