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[目的]宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤,发病率及死亡率很高。N6-甲基腺苷嘌呤(m6A)是真核生物信使(mRNA),微小RNA(miRNA)和长非编码RNA中最常见,最丰富和最保守的一种修饰方式。研究表明,m6A甲基化在癌症发展中起着重要作用,而环状RNA(circRNA)也影响着肿瘤的发生发展。本文拟解析m6A甲基化修饰对circRNA表达和宫颈癌细胞恶性行为的影响及具体的分子机制,从而明确其在宫颈癌中发挥的作用,为宫颈癌的诊断及治疗提供新的思路和方法。[方法]首先,我们对三对宫颈癌组织和癌旁组织的深度测序结果进行分析,筛选出12个在宫颈癌组织中明显高表达的circRNA。RT-qPCR实验联合RNase R处理确定circRNA的存在性以及在宫颈癌组织和细胞中的表达情况。MeRIP-qPCR实验检测其中12个circRNA的m6A修饰情况,确定了 m6A甲基化程度最高的circTANK作为后续的研究对象。通过RT-qPCR实验检测circTANK在宫颈癌细胞中的稳定性及细胞定位情况。应用MTT、平板克隆形成实验,transwell迁移和侵袭实验及裸鼠移植瘤实验检测circTANK对宫颈癌恶性行为的影响。接下来,利用RT-qPCR和MeRIP-qPCR实验检测METTL3对circTANK表达水平和甲基化水平的影响。通过MTT实验和Transwell实验检测m6A修饰水平对circTANK生物学功能的影响。利用RegRNA软件预测了 circTANK可吸附的 miRNA,通过 RT-qPCR 实验和 Western blot 实验验证 circTANK 与 miR-2392之间的靶定和调控关系。通过细胞生物学实验和Western blot实验确定miR-2392对宫颈癌细胞恶性行为的影响。通过生物信息学软件预测,RT-qPCR以及Western blot实验确定了 miR-2392与TAF7和YTHDF3的靶定和调控关系。通过挽救实验证明miR-2392介导circTANK对宫颈癌细胞的功能学的作用。通过RT-qPCR实验和MeRIP-qPCR实验检测YTHDF3对circTANK表达水平,甲基化修饰水平以及稳定性的影响。[结果]RT-qPCR实验证明12个circRNA可耐受RNase R消化,在宫颈癌组织中的表达情况和深度测序的结果一致。MeRIP-qPCR实验结果显示circTANK的m6A修饰程度最高。RT-qPCR实验证明circTANK稳定性较高,主要分布在细胞质中。细胞生物学实验,Western blot和动物实验表明circTANK在宫颈癌中发挥促癌作用。RT-qPCR表明METTL3可促进circTANK的表达及稳定性。MeRIP-qPCR表明METTL3介导了 circTANK的m6A甲基化,细胞生物学实验证明m6A修饰可增强circTANK的促癌作用。Western blot实验和RT-qPCR实验证明circTANK和miR-2392之间的靶定结合及调控关系。细胞生物学实验和Western blot实验证明miR-2392可抑制宫颈癌细胞的恶性行为和EMT进程,表明miR-2392在宫颈癌中发挥抑癌作用。RT-qPCR和Western blot实验结果表明circTANK可通过吸附miR-2392促进TAF7和YTHDF3的表达。挽救实验的结果表明miR-2392可以介导circTANK在宫颈癌细胞中的生物学功能。通过RT-qPCR实验检测发现YTHDF3可促进cricTANK的表达和稳定性,MeRIP-qPCR实验表明YTHDF3可促进circTANK的m6A甲基化水平。[结论]本研究发现METTL3作为circTANK的主要m6A甲基化酶,可促进circTANK的表达,并且circTANK可作为促癌基因促进宫颈癌细胞的恶性行为及体内肿瘤的生长。circTANK可通过吸附miR-2392从而促进下游靶基因TAF7和YTHDF3的表达,进而促进TAF7在宫颈癌细胞中的恶性行为,而YTHDF3又增强了 circTANK的m6A修饰水平,促进了 circTANK的表达和稳定性,从而形成 METTL3/m6A circTANK/miR-2392/YTHDF3-TAF7 通路促进宫颈癌细胞的恶性行为。