背景与目的外泌体是一种直径在纳米级别的细胞外微小囊泡,内含mRNA和miRNA等活性成分,可被不同类型的细胞吸收和释放,尤其是肿瘤细胞。肿瘤来源的外泌体作为miRNA的信息传递载体,能够促进共培养的肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化,最终导致肿瘤的转移,但其在肺癌发生发展中的具体作用机制尚未完全清楚。本研究首次发现外泌体中miR-499a-5p在肺腺癌发生、转移中的生物学功能,并阐明潜在的分子机制,为转移性肺癌提供新的治疗思路。方法本研究首先通过超速离心的方法从三种肺腺癌细胞的培养基中分离出外泌体,使用透射电镜、NTA、荧光染色、Western blot法鉴定外泌体的表型。通过高通量测序发现miR-499a-5p在高转移性肺癌细胞中表达升高,用qPCR法加以验证。其次,通过体外扩增和敲低miR-499a-5p,运用CCK8、划痕实验、transwell迁移试验、Western blot等方法研究其对于细胞增殖、迁移和EMT的影响;建立裸鼠皮下瘤模型,注射激活剂和抑制剂,观察miR-499a-5p对于肿瘤体内生长的影响。进一步探究相关分子机制,引入mTOR通路抑制剂雷帕霉素、激活剂MHY1485,验证miR-499a-5p通过mTOR通路实现上述影响的潜在机制。最后,将不同转移潜力的细胞来源的外泌体与肺癌细胞共培养,观察外泌体对于细胞增殖、迁移和EMT的影响,同时转染miR-499a-5p抑制剂,观察上述影响被阻断的情况。结果本研究发现miR-499a-5p在高转移性肺腺癌细胞来源的外泌体中表达显著上调。通过体内、体外实验证实:过表达miR-499a-5p具有促进肺癌细胞增殖、转移及EMT的作用,而敲低其表达可抑制上述作用;过表达miR-499a-5p可激活mTOR通路,并且雷帕霉素可抑制其诱导的促进肺癌细胞迁移的效果;反之敲低miR-499a-5p可抑制mTOR通路。高转移性肺癌来源的外泌体作为miR-499a-5p的载体,帮助其细胞之间转移,促进肺癌细胞的增殖、迁移和EMT,且该过程可被miRNA抑制剂阻断。结论本研究揭示了肿瘤来源的外泌体中miR-499a-5p与转移的相关性,并在体内和体外验证了miR-499a-5p/mTOR轴促进肺癌细胞增殖、转移及EMT,为转移性肺癌的诊断与治疗提供新思路。