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目的研究电针对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis, UC)模型大鼠肠道微生态及尿液代谢的调控作用,并通过宿主代谢表型初步探讨电针调控肠道微生态的机制,以期为揭示针灸治疗溃疡性结肠炎的机理提供新的、更为充分的实验依据,为深入探讨针灸治疗肠道疾病的作用机理提供基础,也为深入揭示针灸这种多靶点、多层次的复杂体系和全面认识针灸的疗效提供深层次的理论参考和实验依据。方法将39只健康雄性SD大鼠随机分为空白组和模型对照组,UC模型对照组采用饮用浓度为40g/L的葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium, DSS)方法复制溃疡性结肠炎模型,造模成功后再随机分为模型组和电针组。电针组选取“足三里”“关元”进行电针治疗,治疗5天,空白组和模型组不作治疗。1.电针治疗后,对大鼠进行一般情况观察、大便隐血检测、疾病活动指数(Disease Activity Index, DAI)评分、光镜观察组织形态学以及透射电镜观察超微结构观察,评价电针治疗溃疡性结肠炎的效应。2.运用变性梯度凝胶电泳(Denaturing Dradient Gel Electrophoresis, DGGE)方法对电针治疗后各组大鼠的粪便进行肠道微生态多样性进行分析,并对优势条带进行鉴定,寻找针灸治疗作用的关键细菌。3.运用1H NMR的代谢组学方法研究电针治疗后UC大鼠尿液代谢谱及关键代谢物的变化,并通过宿主的代谢表型初步探讨电针改善肠道微生态的机制。结果1.电针治疗UC模型大鼠的效应研究：1)DSS诱导溃疡性结肠炎后,模型大鼠一般状况差,大便出现脓血便,DAI评分显著增高；电针治疗组大鼠精神状况明显好转,大便性状、脓血便等情况得到明显改善,DAI评分下降,组间比较差异有统计学意义(p<0.05)。2)光镜观察结果显示,与空白组相比,模型组回盲部及远端结肠组织粘膜层结构破坏,溃疡形成,粘膜下层充血水肿,大量炎细胞浸润粘膜层,大量游离的坏死组织；电针治疗组肠粘膜结构完整,腺体排列较整齐,粘膜下层无明显充血水肿,只有少量炎细胞浸润,淋巴细胞及成纤维细胞也较少。3)电镜观察结果显示,与空白组相比,模型组回盲部及远端结肠组织微绒毛稀疏、变短,上皮细胞间有大量空泡,细胞核染色质边集,线粒体肿胀,炎细胞广泛浸润。电针组微绒毛相对整齐,线粒体正常,细胞核染色质分布均匀,胞浆均匀,粗面内质网丰富。2.电针对溃疡性结肠炎模型大鼠肠道微生态的调控作用研究：1)DGGE凝胶电泳显示,与空白组相比,模型组肠道菌群的丰度及多样性指数明显降低(p<0.05),差异有统计学意义；与模型组相比,电针组肠道菌群的丰度及多样性指数较模型组有明显增高(p<0.01),差异有统计学意义。2)克隆测序结果：样本优势条带菌种主要归属于拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)及变形菌门(Proteobacteria)三大类,与肠道内主要固有菌群构成相同。其中模型组拟杆菌门和变形菌门细菌总含量较空白组均有下降趋势,而厚壁菌门有上升趋势；电针治疗后,相应菌群含量向正常方向转化。菌种分析结果显示,与空白组相比,乳酸杆菌(Lactobacillus sp.)和毛螺科菌(Lachnospiraceae bacterium)在模型组中含量明显降低(p<0.05)：与模型组相比.电针组含量升高(p<0.05)。3.电针治疗溃疡性结肠炎模型大鼠尿液的代谢表型研究：1)多元统计学方法结果显示,空白组、模型组、电针组呈显著性分离,其中电针组的尿液样本比模型组更靠近空白组。2)采用因子载荷图对造成与空白组出现分离效应的代谢物进行分析显示,电针对尿液中偏离的3-D-羟基丁酸钠(δ1.205,3-D-hydroxybutyrate),马尿酸(63.965,Hippurate)和醋酸盐(δ1.925, Acetate)具有明显的良性调节作削(p值均<0.05)。结论1.动物一般行为学、病理形态学等研究显示电针对UC模型大鼠的症状和病理改变具有良好的改善作用。2.电针对UC模型大鼠肠道菌群的多样性和有益菌群的表达均具有良性调整作用,其中乳酸杆菌、毛螺科菌可能为电针治疗溃疡性结肠炎影响的关键细菌。3.电针对UC模型大鼠尿液中的关键代谢物存在良性调节作用,其中3-D-羟基丁酸钠、马尿酸和醋酸盐为电针影响溃疡性结肠炎的关键代谢物。4.电针对肠黏膜具有保护作用,并能促进细胞对能量物质的利用,这可能是针刺影响肠道微生态的主要机制。