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目的通过分别行眶下神经缩窄术(CCI-ION)及IL-6炎症因子眶下注射建立三叉神经痛大鼠模型,应用行为学检测方法记录大鼠机械敏感阈值的变化,用分子生物学实验探究胶质细胞及JAK/STAT3通路在三叉神经痛模型大鼠三叉神经节中的变化及其意义。方法选取60只正常SD大鼠(120-150 g)进行五天的适应性喂养和刺激训练,筛选对一定量刺激反应平静且健康的正常大鼠。第一阶段实验:将实验大鼠随机分为四组:IL-6注射组及相应的对照组NS注射组,CCI-ION组及相应的对照组Sham组。使用Von Frey hair测量并记录四组大鼠造模后7天内触须垫处的机械敏感阈值。并分别于术后第48小时、3天、7天时将实验大鼠处死并取出造模同侧的三叉神经节,用Western blot、PCR、免疫荧光技术检测4组实验大鼠内pSTAT3及卫星胶质细胞、小胶质细胞标记物的表达水平以及三叉神经节中有pSTAT3免疫荧光染色定位的细胞类型。第二阶段实验:按照随机分组的原则,三叉神经痛模型大鼠经造模同侧的眶下孔注射给药AG490(JAK/STAT3通路抑制剂)或DMSO(作为对照)即分为CCI-ION组+AG490、IL-6注射组+AG490,CCI-ION组+DMSO、IL-6注射组+DMSO,给药期间监测4组大鼠的机械敏感阈值变化。并在造模后第7天(即给药第8天)将实验大鼠处死,取出同侧的三叉神经节,用Western blot、PCR技术分别检测实验大鼠中pSTAT3蛋白、SOCS3m RNA及卫星胶质细胞、小胶质细胞标记物的表达水平。最后统计分析数据。结果1、三叉神经痛模型大鼠构建后,测量结果表明CCI-ION组大鼠的机械敏感阈值较Sham组显著降低,IL-6注射组大鼠的机械敏感阈值较NS注射组亦显著降低,并都在第7天时达到最低值。2、免疫荧光结果显示:Sham组及NS注射组的造模同侧三叉神经节中几乎看不到pSTAT3荧光染色标记的存在,而CCI-ION组及IL-6注射组的造模同侧三叉神经节中均可以观察到大量的pSTAT3荧光染色标记的存在;用pSTAT3分别与卫星胶质细胞的标记物GFAP、小胶质细胞的标记物ITGAM、神经元的标记物Neun进行荧光双染实验后发现:在CCI-ION组及IL-6注射组大鼠的同侧三叉神经节中均观察到pSTAT3与ITGAM有大量的共染,即表明pSTAT3定位于小胶质细胞中。Western blot实验结果显示:CCI-ION组大鼠三叉神经节中pSTAT3的蛋白表达水平较相应的Sham组高;同样地,IL-6注射组的pSTAT3蛋白表达水平较NS注射组高。3、卫星胶质细胞标记物GFAP蛋白的Western blot实验及小胶质细胞标记物ITGAM m RNA的RT-PCR实验结果表明,CCI-ION组大鼠三叉神经节中GFAP蛋白及ITGAM m RNA的表达水平均较应的Sham组高;同样地,IL-6注射组的GFAP蛋白及ITGAM m RNA的表达水平亦均较NS注射组高。4、三叉神经痛模型大鼠在给予抑制剂AG490或DMSO后的机械阈值检测结果示:CCI-ION/AG490组大鼠的机械阈值较CCI-ION/DMSO组大鼠从给药后第4天开始即有明显的上调并一直持续到第8天,同样地,IL-6/AG490组的机械阈值相较IL-6/DMSO组也有明显的上调(从给药后第4天到第8天)。5、给药后的Western blot及RT-PCR实验结果表明,CCI-ION组或IL-6组大鼠在给予AG490后的第8天,相较于给予DMSO做对照的CCI-ION或IL-6组,pSTAT3、GFAP蛋白及SOCS3m RNA的表达水平均明显降低;而AG490给药对CCI-ION组以及IL-6注射组三叉神经节内的小胶质细胞标记物ITGAM的m RNA表达均无明显影响。结论分别通过采用慢性眶下神经缩窄术及IL-6注射建立的大鼠三叉神经痛模型中,胶质细胞及JAK/STAT3通路都被激活,且活化的STAT3定位于小胶质细胞内,而给予JAK/STAT3通路的抑制剂AG490后可以观察到pSTAT3、GFAP蛋白及SOCS3m RNA的表达均明显降低且伴随着机械敏感阈值的明显下调。表明JAK/STAT3信号通路可能参与了大鼠三叉神经痛的发生发展,以及JAK/STAT3通路可能参与调控了卫星胶质细胞的活化。