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研究目的 近年来心肌细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤(MI/R)的密切相关性越来越引起了人们的重视。通过药物抑制心肌细胞凋亡是急性心肌梗死(AMI)后药物干预措施发挥作用的良好靶点。胰岛素(insulin)是由胰腺β细胞合成、分泌的一种含51个氨基酸的激素，其主要功能是调节人体糖、脂肪、蛋白质代谢。除此之外，胰岛素对心血管系统也存在重要的调节作用。40多年前，人们就发现极化液(葡萄糖-胰岛素-钾溶液，GIK)可减轻急性心肌梗死患者的心电图变化，提示GIK具有抗心肌缺血作用。但迄今为止，人们对GIK的疗效仍存在争议，其机制也不明确。本实验旨在观察高剂量极化液(HGIK)与传统的、临床目前常规应用的极化液(LGIK)对家兔急性心肌缺血/再灌注心脏功能和心肌细胞死亡的影响，分析GIK中发挥心肌保护作用的关键成分，并初步探讨其中的主要机制，验证胰岛素抗心肌细胞凋亡的生理作用。 实验方法 1．制备兔MI/R模型，缺血45 min，再灌注3 h。分别用HGIK，LGIK，胰岛素，糖钾液(GK)，生理盐水干预分组。第四军医大学硕士学位论文 2.观察血流动力学与心功能指标; 3.再灌注结束后检测心肌梗死面积，心肌组织ATP、游离脂肪酸、乳酸、SOD及MDA含量，检测血清CPK值。 4.流式细胞仪(F CM)、原位末端标记(T UNEL)法测定凋亡心肌细胞，免疫组化法测定凋亡相关基因Bcl一2，Fas的表达。实验结果 1.血流动力学及心功能指标:各处理组动物的心率、血压、LvEDP、LvdP/dt ma、在缺血前未见显著性差异。缺血后心率加快，血压下降(P<0.05)，室内压及其微分出现降低，但各组间差异无显著性。再灌注3h时，与生理盐水对照组相比，HGIK、胰岛素、LGIG组LvEDP明显降低(p<0.05)，Lvdp/dtlna二值明显增大(p<0.05)。而GK组与对照组相比无明显差异(P>.05)。HGIK和胰岛素组间无差异(P>0.05)，HGIK组与LGIK组相比有显著差异(P<0.05)o 2.心肌坏死指标:与对照组相比，HGIK、LGIK和胰岛素组的心肌梗死明显降低(P<0.05)，CPK值增幅显著降低，而GK组心肌梗死面积无差别(P>.05)。而且HGIK组和胰岛素组间无差异(P>0.05)，HGIK组与LGIK组相比存在差异 (P<0 .05)。 3.心肌能量代谢测定:与对照组比较，HGIK组及胰岛素组和LGIK组均降低心肌组织FFA含量(P<0.05)，增加心肌组织Al，P含量(P<0.05)，HGIK组和胰岛素组间无差异(P>0.05)，HGIK组与LGIK组相比存在差异(P<0.05)。各组间乳酸含量无明显差别。 4.心肌组织SOD和MDA含量:与对照组比较，HGIK组及胰岛素组和LGIK组均增加SOD活性(P<0.05)，降低心肌组织MDA含量(P<0.05)，HGIK组和胰岛素组间无差异(P>.05)，HGIK组与LGIK组相t匕存在差异(P<0.05)。第四军医大学硕士学位论文 5.流式细胞仪、原位缺口末端标记法、免疫组化方法测细胞凋亡指标:与对照组比较，HGIK组及胰岛素组和LGIK组均降低细胞凋亡(P<0.05)，GK组凋亡细胞无明显减少(P>.05)。而且HGIK组和胰岛素组间无差异(P>0.05)，与LGIK组相比存在差异(P<0.05)。结论 GIK具有抗缺血再灌注损伤的作用，两种剂量GIK心肌保护作用有显著差异，高剂量GIK心肌保护作用显著强于低剂量GIK。其机制可能是通过胰岛素调节Bcl一2和Fas介导的心肌缺血再灌注细胞凋亡而实现。