【摘 要】
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睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni，C．T．)中的3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-HSD/CR)是降解环境中甾体类化合物的关键酶。本文通过同源整合的方法将绿色荧光蛋
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睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni，C．T．)中的3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-HSD/CR)是降解环境中甾体类化合物的关键酶。本文通过同源整合的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因整合到C.T.菌的染色体DNA中的3α-HSD/CR基因下游，得到C.T-GFP突变菌株。该突变株GFP的表达强度与甾体化合物的含量在一定范围内成正相关。比较了CT-GFP细胞体系和非细胞体系在检测甾体化合物时的差别，分别探讨了GFP的荧光强度与甾体化合物的浓度及作用时间关系。结果发现非细胞体系比细胞体系检测系统灵敏度高，并且两种生物检测系统对雌二醇检测灵敏度高于睾丸酮，且灵敏性达到fg级水平。利用非细胞体系检测方法对吉林省主要水源进行了检测分析，并与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比，结果显示该方法具有可行性，并且检测的灵敏度高于高效液相方法6个数量级。本文所研究的荧光检测系统具有快速、操作简单、稳定、敏感等特点，为食品安全及环境监测提供新的技术方法。
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