论文部分内容阅读
随着生活水平的提高,人们对食品安全越来越关注。近年来,非法添加工业染料事件时有发生。酸性工业染料未被列入GB 2760-2011《食品添加剂使用标准》中,属于不可食用合成色素范围。食品中碱性工业染料的研究已经比较成熟,各相关检测机构根据碱性工业染料的国家标准、地方标准及行业标准开展检测监管工作,同时研究出了许多权威可行的检测方法。而酸性工业染料的检测技术在国家及行业标准规范中还是空白。所以很有必要建立肉制品中多种酸性工业染料的同时测定方法,为此类食品污染物的检测提供预警技术储备,以便能从容应对突发的食品安全事件。本文分别研究了高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)及超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定肉制品中14种酸性染料的分析方法。研究内容主要包括:(1)建立了可行的前处理方法:对肉制品经90%甲醇水提取后,采用Waters-WAX固相萃取柱净化,5%氨水甲醇洗脱,浓缩并定容后经液相或液质测试。(2)确定了 HPLC-DAD法分析14种酸性染料的方法条件:采用Inertsil ODS-SP分离,以甲醇/乙腈(50/50,v/v)-乙酸铵为流动相体系,通过梯度洗脱,多波长检测,所有目标化合物分离完全,根据色谱峰保留时间和光谱图定性,外标法定量。经方法学验证:14种酸性染料在0.5～20 mg/L的浓度范围内具有良好的线性关系。最低检出限为4.5～12.0 μg/kg,定量限为15.0～40.0 μg/kg。在40,80,200 μg/kg的三个添加水平下平均回收率为75.39%～98.36%,日内精密度在0.1%～3.5%,日间精密度在0.4%～4.5%。(3)确定了 UPLC-MS/MS法分析14种酸性染料的方法条件:采用Waters ACQUITY UPLCBEHC18分离,以乙腈-乙酸铵为流动相体系,负离子电离,多反应监测模式(MRM)进行定性定量分析。14种酸性染料在10～100 μg/L的浓度范围内具有良好的线性关系。最低检出限为1.5～2.5 μg/kg,定量限为5.0～8.0 lμg/kg。在10,20,50 μg/kg的三个添加水平下平均回收率为70.33%～97.66%,日内精密度0.3%～4.8%,日间精密度在0.7%～6.5%。(4)用建立的两种分析方法对150份肉制品进行检测,检出率为4%。同时采用超快速液相色谱离子阱飞行时间质谱法对阳性样品进行确证,确证率为100%。综上所述,本文建立的HPLC-DAD和UPLC-MS/MS方法灵敏度高和准确性高,适用于分析肉制品中可能违法添加的酸性染料。