论文部分内容阅读
免疫治疗是继手术、化疗和放疗之外的第四种肿瘤治疗手段,已成为人类未来对抗肿瘤的新希望。作为抗肿瘤免疫中最主要的效应细胞,细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)其功能的有效发挥是免疫治疗成功的关键所在,但CTLs细胞在肿瘤免疫抑制微环境中通常诱导进入“免疫无能”状态,进而难以有效发挥抗肿瘤效应。微小RNA(microRNAs,miRNAs)是新近发现的一类具有调控功能的非编码RNA,它的长度约为20~22个核苷酸,被证实在T细胞功能调控中发挥着举足轻重的作用。本课题证明了microRNA-26a(miR-26a)在肿瘤微环境中负向调控CTLs的功能。首先我们对非小细胞肺癌病人胸水及对应的外周血样本中CTLs进行了miRNA芯片检测,发现较对应外周血来源CTLs,胸水来源的CTLs中miR-26a表达显著上调,同时其与CTLs细胞效应分子GranzymeB的表达强度呈明显负相关。并且发现miR-26a过表达后可显著抑制CTLs细胞效应分子IFN-γ(interferonγ)和Granzyme B的分泌。证实了肿瘤微环境中细胞因子可诱导CTLs中miR-26a的表达,并且与CTLs免疫无能密切相关。众所周知,miRNAs分子其生物学功能的实现是通过直接阻遏甚至直接降解靶m RNA,从而抑制靶分子的表达。为了探究miR-26a负向调控CTLs细胞功能的分子机制,我们进一步研究了miR-26a的靶基因。首先通过软件预测了miR-26a的潜在靶基因,在众多潜在靶基因中,EZH2(enhancer of zeste homolog 2)基因的3’-UTR序列上存在miR-26a的结合位点,且大量研究证实了EZH2与CTLs功能密切相关。我们利用双萤光素酶报告实验直接证实了EZH2为miR-26a的靶基因。同时检测到在肿瘤微环境中CTLs细胞上EZH2的表达是下调的,当EZH2受到抑制时CTLs的功能也会受到损坏。这就表明在肿瘤微环境中miR-26a通过靶向抑制EZH2诱使CTLs功能受抑。本课题完善了肿瘤微环境所致的CTLs功能受抑的分子机制,也将为抗肿瘤免疫治疗提供新的靶点。