藜芦根内放线菌筛选、抑菌活性初探及Plantactinospora veratri新种鉴定

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jeff1986928
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由于常规技术的不断应用和病原菌耐药性的产生,使得从土壤等传统分离源中分离新的放线菌和化合物变得越来越困难,因此人们将目光投向了动植物、海洋和沼泽等分离源。药用植物中天然活性物质种类多样,放线菌与植物长期共存,很有可能通过基因水平转移获得其遗传特性,使得其中一些内生菌也具有产生某种相同或相似生物活性物质的能力。因此实验中将药用植物藜芦作为分离源,以增大后期从中分离到新型天然活性化合物的概率,并为其研究提供后备菌种。实验中在五常凤凰山采集了药用植物藜芦(Vertrum nigrum L.)的样品,以根部作为放线菌的分离源,使用四种分离培养基对其进行放线菌筛选,通过管碟法和平板对峙法测定了它们的抑菌活性,并从中挑选了一株形态较为少见且对枯草芽孢杆菌具有活性的菌株进行了多相分类学鉴定。主要得到以下结果:(1)本实验对3株中国传统中药藜芦根部中的放线菌进行了筛选,分别从HV、高氏一号、改良高氏二号培养基和GGXAG培养基上分离得到7、15、4和1株放线菌,共计27株。经形态学初步鉴定,这些菌株大部分分布于链霉菌科(Streptomycetaceae)和小单孢菌科(Micromonosporaceae)。(2)细菌活性测试中,有9株菌LL1,LL2,LL3,LL4(NEAU–FHS4),LL7,LL16,LL18,LL20,LL25的发酵浸提液对枯草芽孢杆菌和藤黄微球菌中的至少一种有抑制作用;真菌活性测试中有4株(LL1,LL2,LL7,LL18)放线菌对3种以上的植物病原真菌具有较强活性。LL2活性较好且具有广谱抑菌作用,对实验中的9种植物病原真菌及2种指示细菌均具有较强或较弱的抑制作用。(3)对一株形态较为少见,且对枯草芽孢杆菌具有抑制作用的菌株NEAU–FHS4进行了系统的分类学地位鉴定。首先通过16S rRNA序列分析,发现该菌株与植物产孢放线菌属(Plantactinospora)的三株菌形成一个分支。然后通过对该菌株与相似菌株在多种培养基上的形态特征、耐受度和酶学实验、细胞化学组分以及分子水平的同源性等方面的比较,确定NEAU–FHS4属于植物产孢放线菌属的一个新种,并命名为Plantactinospora veratri。
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