生物分子识别作用是生物体内许多生化反应进行的基础,在生物体的生长、发育、繁殖等一系列的过程中起着重要的作用。常见的生物分子识别元件,如抗体、受体、核酸、酶等,由于与其目标分子具有高的特异性与亲和力,被广泛应用于物质的分离与分析检测中。随着近年来对分析方法灵敏度和自动化程度要求的不断提高,某些分子量较大的识别元件,如抗体、受体等蛋白分子,由于分子体积较大、稳定性差和容易发生副反应等缺点,在发展快速、高通量检测手段的应用中受到限制。在生物分子识别过程中,往往只是生物分子的一部分结构参与识别过程,这部分结构可以看作是生物分子的核心识别元件。本论文选择抗体和受体蛋白为研究对象,分别探索了抗体核心识别元件Fab片段和受体核心识别元件配体结合域片段的制备和在生物分析和分离中的应用。论文内容共包括六章。　　第一章对常见的生物分子识别元件、生物分子识别元件在分离分析中的应用以及研究生物分子识别元件及其与目标分子相互作用的方法做了综述。通过雌激素受体配体结合域与抗体Fab片段探讨了生物分子核心识别元件的优势,在此基础上提出了本论文的研究目的和研究思路。　　第二章利用酶标记的兔抗人免疫球蛋白A建立了竞争法检测人唾液中免疫球蛋白A的酶联免疫吸附分析方法,并用于实际样品的检测。竞争法比夹心法所需的检测时间更短,并且受到抗体的批次不同的影响更小。　　第三章首先提出了一种在线酶切制备Fab的方法。通过将抗体定向固定化在聚甲基丙烯酸环氧丙酯/甲基丙烯酸乙二醇酯整体柱表面,对抗体进行在线酶切,简化了产物的分离纯化步骤,可以直接得到较纯的Fab片段。将制得的Fab片段偶联到11-巯基十一酸修饰的纳米金溶胶表面获得纳米金标记的Fab片段,与异硫氢基荧光素标记的抗原相结合,建立了均相检测抗原分子的荧光免疫传感体系。研究结果表明,使用Fab片段有利于减少荧光基团与猝灭基团间的距离,比完整的抗体分子能达到更高的荧光猝灭效率。建立的均相免疫传感体系可以在10分钟内实现信号响应,与非均相酶联免疫吸附方法相比,操作步骤大大简化,检测时间显著缩短。　　第四章研究了利用雌激素受体配体结合域片段制备受体亲和柱,通过受体亲和纯化-液相色谱-质谱联用检测雌激素类化合物的方法。结果表明,利用重组受体蛋白末端标签定向固定化获得的受体亲和吸附剂更利于保持固定化受体蛋白的活性和提高亲和柱的吸附容量。利用这一方法对自来水样中的双酚A进行了富集、纯化与检测。　　第五章利用香豆雌酚作为雌激素受体的配体,其荧光性质会在结合雌激素受体前后发生变化的特点,设计比较了多种均相荧光传感器。结果表明利用Tween20作为添加剂可以消除BSA与香豆雌酚的特异性结合。利用雌激素受体与香豆雌酚分子问的荧光共振能量转移,可以对雌激素类化合物实现检测,且检测结果与使用受体亲和色谱-液质联用方法检测的结果一致。这种方法具有无需标记、简单、快速、灵敏的特点。　　第六章对文章进行了总结,并对未来的工作进行了展望。　　本论文的研究结果不仅可以直接用于对目标蛋白分子及小分子目标物的快速灵敏检测,而且为进一步发展基于蛋白分子核心识别元件的高通量检测平台奠定了良好的基础。