29株虫生真菌的鉴定及其对烟粉虱的毒力测定

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虫生真菌是重要的生物资源,在害虫生物防治中具有重要作用。由于虫生真菌种类多、致病力不一,明确物种的分类学地位,是认知和利用好生防真菌的基础和前提条件。本文对华南农业大学生物防治教育部工程技术研究中心保存的29株白僵菌菌株,分别从形态学和分子学水平上进行了分类鉴定,明确了其分类地位,同时测定了各菌株对世界性重要害虫—烟粉虱的致病力,筛选出高毒力菌株。(1)虫生真菌的形态学鉴定:比较了不同菌株的菌落形态、菌株直径、产孢量及孢子结构,结果表明:拟定的29株白僵菌中,经复核后有26株菌株的形态特征符合白僵菌的特征,菌株SB003、SP665、SP670通过形态复核,认定为棒束孢属。菌株间的菌落形态、菌落直径、产孢量、孢子结构虽存在一定差异,但形态特征以及孢子间存在相互交叉,仅根据传统分类方法不能把29株菌株鉴定到各属的种。(2)虫生真菌的分子生物学鉴定:通过比较菌株的ITS区、TEF区、Bloc区序列,利用系统发育分析方法,进一步确定其菌株的分类地位。结果表明:各菌株ITS区序列一致性程度很高,假球孢白僵菌与球孢白僵菌呈现交叉状态,仅应用ITS片段建树无法确定菌株的分类地位;利用TEF区序列、Bloc区的序列、TEF-Bloc联合序列构建系统发育树,鉴定结果为:29株菌株包括24株球孢白僵菌,分别为SB673、SP433、SB050、SB062、SB038、SB672、SB674、SB037、SB032、SB063、SB671、SB036、SB043、SB035、SB057、SB015、SP016、SB026、SB004、SP031、SB010、SB006、SB009、SB051;2株假性球孢白僵菌,分别为SB039、SB041;3株环链棒束孢,分别为SB003、SP665、SP670。(3)不同菌株对烟粉虱毒力测定:分别配制29株菌株浓度为1×10~7孢子/m L和1×10~8孢子/m L的孢子悬浮液,测定不同菌株对烟粉虱2龄若虫的致病性。结果表明:烟粉虱2龄若虫的死亡率随孢子浓度的增加而增加,且不同菌株致病力不同。白僵菌对烟粉虱2龄若虫的致死效果最好,结合优良菌株菌落生长速度和致病力标准,菌株SP433和SB009在烟粉虱防治中具有很高应用潜力,其孢子浓度为1×10~7孢子/m L时,侵染率达69.03%和67.93%,当孢子浓度为1×10~8孢子/m L时,侵染率达87.37%和82.93%。本文从形态学和分子生物学方面对已有虫生真菌菌株进行了复鉴,并明确了高毒力的烟粉虱致病菌,为本文鉴定的虫生真菌菌株提供了分类学依据,另外,本文筛选获得的高致病力菌株可为烟粉虱的生物防治提供理论依据和试验材料。
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