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世界上最早被发现的病毒就是烟草花叶病毒(Tobacco msaic virus,TMV),TMV严重影响着我国烟叶的产量和质量,每年对我国烟草的生产造成巨大的损失,但是到目前为止并没有一种可以根治烟草花叶病毒(TMV)的药剂。前期已有研究者从药用植物鸦胆子中分离出一种对烟草花叶病毒(TMV)有很好的抑制作用的化学物质—鸦胆子素D(BruceineD),基于植物内生真菌与宿主之间互利共生的关系,植物内生真菌能够产生与宿主相同或相似的化合物,研究室早期对鸦胆子植物中的内生真菌进行了分离纯化,并对这些真菌的代谢产物进行抗TMV活性的粗测,本文选取其中一株较好的抗TMV的内生真菌Br11进行深入的研究。本文对鸦胆子植物的一株内生真菌Br11进行代谢产物分离及其抗TMV活性的研究。发酵该菌株,利用多种色谱分离技术如硅胶柱层析、RP-C18层析柱、SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱层析等对其发酵产物进行分离纯化,得到6种单体化合物和一个胞外多糖(Extracellular polysaccharide,EPS),分别编号为 1-7。通过1H-NMR、13C-NMR波普技术分析,对这6种化合物结构进行鉴定及查阅文献对比,得出化合物1-6分别为DothioreLone A、Dothiorelone B、Dothiorelone C、Dothiorelone H、Cytosporone C、Cytosporone U。对这些分离出来的化合物进行了抗TMV活性研究,采用半叶枯斑法和叶碟法分别测定这几种化合物对TMV侵染和增殖的抑制活性。结果表明胞外多糖(组分7)有很强的抗TMV侵染效果,其IC50为0.93μg/mL,但抗TMV增殖效果不明显。化合物6 Cytosporone U有较强的抗TMV增殖的作用,其IC50为144.60μg/mL。采用Western-blot和农杆菌浸润法进一步测定化合物6在烟草植株内抗TMV的生物活性。结果发现在浓度为200 μg/mL时,化合物6起到很好的抗TMV-CP表达、抗TMV增殖和运动的效果,其有效时期为7天。本文通过形态学与分子生物学相结合的方法对Br11菌株进行了鉴定,该真菌在PDA培养基上菌落生长迅速,菌丝丝状长管,有隔,颜色由白色变为淡黄色再变为深黄色,并产生了黄色的可溶性色素。采用内生真菌通用引物ITS 1和ITS 4对Br11菌株的28S rRNA的保守区序列进行PCR扩增并对扩增产物进行序列测定,通过BLAST分析序列的同源性,发现该菌株与拟茎点霉属同源性最高,为99%。通过构建系统发育树,发现Br11菌株与拟茎点霉属在同一分支上。同时对Br11菌株进行了不同培养条件下的诱导产孢实验,均没有发现Br11菌孢子的形态。综合以上及相关文献描述,确定Br11菌株为不产孢的拟茎点霉(Phomopsis sp)真菌。