大麻二酚对小鼠脑出血后急性期神经保护作用及机制

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研究目的1研究大麻二酚对小鼠脑出血急性期神经功能的保护作用。2探讨大麻二酚在脑出血后急性期抑制炎症反应和神经元凋亡的作用并研究其机制。研究方法1胶原酶法制作C57/BL6小鼠脑出血模型,将实验组小鼠随机分为四组:假手术组、对照组(单纯性脑出血模型组)、模型+CBD2mg/kg组和模型+CBD20mg/kg组。除却假手术组,其他各组小鼠均为脑出血模型。2制备C57/BL6小鼠脑出血模型2h后,模型+CBD2mg/kg组予以腹腔注射2mg/kg剂量大麻二酚;模型+CBD20mg/kg组予以腹腔注射20mg/kg剂量大麻二酚;模型组和假手术组组术后2h经腹腔注射等量安慰剂(2%吐温80+生理盐水)。每组给药时间位于脑出血模型建立后2h、12h、24h、36h、48h和60h,药物现配先用。3在脑出血模型成功后第1h和72h参照Grip Test神经行为学评分标准对小鼠进行神经行为学功能评分。72h后根据需要采用不同方法处死各组实验小鼠,检测各组脑出血小鼠脑水肿,炎症反应相关蛋白、细胞和因子,以及细胞凋亡相关。4通过上述实验,进一步设计相关实验方法检测小鼠脑出血后大麻二酚对神经功能保护机制。结果1 Grip Test评分结果:术后1h,假手术组神经功能基本未损伤,3组脑出血模型组较假手术组神经功能损伤明显,评分结果明显低(P﹤0.05),差异具有统计学意义,3组模型组之间评分无明显差异(P﹥0.05);术后72h,与对照组相比,模型+CBD20mg/kg组神经行为学功能明显改善(P﹤0.05),差异具有统计学意义。2脑水肿检测结果:术后72h,与对照组比较,模型+CBD20mg/kg组可以明显降低脑组织水含量,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。3炎症相关表达:术后72h,与对照组比较,模型+CBD20mg/kg组可以明显降低脑组织炎症因子、HMGB1以及小胶质细胞数目表达,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。4细胞凋亡:术后72h,与对照组比较,模型+CBD20mg/kg组可以明显降低脑组织NICD、PARP-1、caspase-3阳性细胞数和TUNEL染色细胞数表达,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。结论通过本实验研究,证明大麻二酚可以减轻C57/BL6小鼠脑出血后减轻神经功能受损,改善神经功能。大麻二酚可能通过抑制HMGB1蛋白表达从而抑制小胶质细胞的聚集和激活,进而抑制炎症因子表达,最终减轻炎症反应;可能通过抑制Notch信号通路激活抑制NICD蛋白激活,进而抑制PARP-1蛋白激活,从而抑制caspase-3激活,最终抑制细胞凋亡。
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