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本文针对含油废水的生物处理，采用低温驯化法从石油污染土壤中筛选出具有石油降解能力的菌株6株，选育2株原油降解能力较高的菌株JA和JB作为实验菌株，并对其生理生化特性进行研究。利用筛选的原油降解菌 JA和JB，考察菌株复配比例、pH值、原油质量浓度、菌液投加量对游离混合菌降解性能的影响，采用响应面法优化降解条件，并研究其生物降解动力学特征。以农业废弃物核桃壳为载体，吸附法制备固定化菌株，考察菌株复配比例、pH值、原油质量浓度、载体投加量、菌株固定化时间对固定化混合菌降解性能的影响，采用响应面法优化降解条件，并研究其生物降解动力学特征。 菌株生理生化特性试验结果表明，菌株 JA菌落呈圆形，边缘整齐，表面光滑低凸起，颜色为黄色，革兰氏染色呈阴性，不产芽孢。菌株 JB菌落呈圆形，边缘整齐，表面湿润扁平，颜色为淡黄色，革兰氏染色呈阴性，不产芽孢。根据 JA和JB形态特征、生理生化特性分析，初步鉴定 JA和JB为假单胞菌属（Pseudomonas sp）。对 JA和JB进行生长特性研究，确定 JA最佳生长时间为18-23h，JB最佳生长时间为20-21h。 游离菌降解含油废水的影响因素研究结果表明，低温原油降解菌 JA和JB按1:2混合后，原油降解率可由单菌的23.4％增加到混合后的49.6%。游离混合菌降解原油过程中，p H值是最重要的影响因素，其次是原油质量浓度、生物接种量。在 pH值7.15、原油质量浓度3387mg/L、生物接种量75ml/L条件下，游离混合菌的降解率最高达55.76%，二级动力学模型对游离混合菌生物降解过程具有较好的拟合效果。 固定化菌处理含油废水的影响因素研究结果表明，固定化单菌和固定化混合菌的最大原油降解率分别为43.75%和63.92%。固定化混合菌降解原油过程中，微生物固定化时间是最重要的影响因素，其次是 pH值、原油质量浓度和固定化混合菌投加量。此外，原油质量浓度和固定化混合菌投加量、原油质量浓度和固定化时间的交互作用对原油降解率的影响极显著。在原油质量浓度4300mg/L、pH值7.9、固定化混合菌投加量27g/L、固定化时间28.5h条件下，固定化混合菌对原油的降解率最高达69.94%，一级动力学模型对固定化混合菌生物降解过程具有较好的拟合效果。