从酱油渣中回收制备异黄酮及多肽的工艺研究

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本文研究了酱油渣中大豆异黄酮以及多肽的提取和纯化工艺。根据大豆异黄酮的性质,首先优化大豆异黄酮的提取工艺,采用沉淀法和溶剂法结合的方式对大豆异黄酮提取液进一步纯化,提取大豆异黄酮后剩余的沉淀进行酶解,优化酶解工艺,采用膜分离技术对酶解液进行浓缩,通过真空冷冻干燥得到多肽产品。实验结果为工业化设计提供了依据。基于大豆异黄酮的溶解性和对环境友好的考虑,本文采用了乙醇-水体系进行大豆异黄酮的提取,确定了高效液相色谱法检测提取液中大豆异黄酮,以大豆苷,大豆苷元,染料木苷,染料木素四种样品总和来代表大豆异黄酮的总量。通过单因素和正交实验,确定了在乙醇-水溶液作为提取剂的实验中乙醇浓度为55%,提取时间为3.5h,提取温度为50℃,料液比为1:11的最优提取条件。本文选用沉淀法与溶剂法相结合的方式来纯化大豆异黄酮的粗提液,将大豆异黄酮粗提液浓缩至不同比例后离心,经比较,将大豆异黄酮粗提液浓缩至原体积的1/4时,沉淀中大豆异黄酮的含量最高,可达12%,且损失较小,损失率为12.1%。将沉淀法得到的大豆异黄酮提取物加纯水稀释,综合考虑含量及萃取率两方因素,最终选择乙酸乙酯为萃取溶剂,在经过3次等体积萃取后,大豆异黄酮含量达到35%,萃取率为88%。将酱渣提取大豆异黄酮后的剩余沉淀进行酶解反应,选取碱性蛋白酶为最佳用酶。通过单因素实验和正交试验得到酶解的最优条件为pH9,酶解时间为3.5h,酶解温度为50℃,料液比为1:8,加酶量为2.5%。确定截留分子量为300-500Dal的DL膜进行酶解上清液的膜浓缩实验,工作参数为:进口压力为1.6MPa,出口压力为1.3MPa,温度为40℃,平均通量可达1.00kg m-2 min-2,脱盐率为88.2%,蛋白的损失率为3.2%,其中分子量在1638以下的占总量的87.84%。使用真空冷冻干燥技术对膜的截留液进行干燥,整个干燥过程持续20h左右,所得产品为淡黄色粉末,含水量<4%,具有较高的自由基清除率。
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