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目的:
研究玉竹多糖对四氧嘧啶糖尿病大鼠胰岛β细胞损伤的保护作用及其机制。
方法:
1.采用水煎醇沉工艺提取出玉竹多糖,初步鉴定其理化性质,进行急性毒性实验;
2.进行正交实验以确定玉竹多糖的最佳提取工艺;
3.通过糖耐量实验、检测胰岛素和胰岛匀浆各项氧化指标以及观察胰岛病理,明确玉竹多糖是否可对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠胰岛β细胞的功能损伤具有保护作用。
结果:
1.利用水煎醇沉工艺成功提取出玉竹多糖,经鉴定符合多糖的标准;
2.玉竹多糖灌胃给药无法测出LD50,最大耐受量试验显示MTD>50g/kg;
3.正交实验优化玉竹多糖的最优提取工艺为:浸提温度90℃,固液比1:30,浸提时间3h,醇沉浓度90%。在优化条件下提取的玉竹多糖样品,提取率为15.36~16.95%,干燥成品中多糖含量为85.03~87.50%;
4.按180mg/(kg.bw)的剂量,给禁食不禁水12h的大鼠一次性腹腔注射新鲜配制的2%四氧嘧啶溶液,可成功诱导糖尿病动物模型,成模率为77.3%;
5.玉竹多糖中、高剂量组食量、饮水量和尿量的增加明显低于模型对照组(P<0.05),FPG、2hPG明显降低(P<0.01,P<0.05),空腹血清胰岛素水平明显增高(P<0.05),胰腺组织中SOD和CAT的活性较模型对照组明显升高(P<0.05),NIDA含量明显降低(P<0.05),高倍镜下显示胰岛萎缩不明显,胰岛内平均正常细胞数明显增加(P<0.05)。
结论:
1.实验条件下提取的玉竹多糖样品中多糖成分含量较高,无不良物质残留;
2.玉竹多糖毒性极低,临床和药效学研究用药安全;
3.优选出的玉竹多糖水煎醇沉工艺操作简便、稳定可靠、成本较低、提取率高;
4.实验条件下利用四氧嘧啶诱导的糖尿病动物模型,成模率高,是检测药物降血糖作用和抗氧化特性较理想的模型;
5.实验提示,玉竹多糖干预后,可以对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠胰岛β细胞的功能损伤产生一定的保护作用,并呈一定的剂量效应关系。机制可能与玉竹多糖增强大鼠胰岛细胞抗氧化酶SOD和CAT的表达,增强对自由基的清除,减轻四氧嘧啶引起的过氧化损伤有关。