黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceuus(Fisch.)Bge.var.mongholi cus(Bge.)Hsiao 或膜荚黄芪 Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1],主要成分为黄酮、皂苷、多糖,此外还有氨基酸、微量元素、脂肪酸等,临床上,常用于心血管类、消化系统类疾病的治疗。目的:大兴安岭作为黄芪种植的一个新产源,目前尚未被大众认可,文献对于大兴安岭产黄芪报道极少。本课题以大兴安岭产黄芪为主要研究对象,建立黄芪中多糖、黄酮和皂苷成分的分析方法,用于大兴安岭产黄芪质量研究,在确定本地区黄芪质量的基础上,开发大兴安岭产黄芪总黄酮-总皂苷复合提取物。最终,期望研究结果可以促进并带动大兴安岭地区黄芪的产业化发展和经济发展。方法:(1)采用单因素考察确定总多糖、总黄酮、总皂苷的提取条件,建立分析方法,对黄芪药材、炮制品及地上部分进行了含量测定。(2)建立黄酮类成分的含量测定的HPLC方法及黄酮HPLC特征图谱,测定不同产地的黄芪药材、黄芪炮制品中毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量,对不同来源的黄芪药材及炮制品的黄酮特征图谱进行比较。(3)采用药典方法,对山西、甘肃、内蒙古、大兴安岭四个产地10批药材,进行TLC薄层鉴别和水分、灰分、浸出物的检测。(4)结合建立的含量测定方法,对炮制品进行含量测定。(5)以提取物得率、总黄酮、总皂苷含量为评价指标,确定最佳提取工艺,制备3批提取物,建立复合提取物质量标准。结果:(1)采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量,不同产地黄芪药材中总多糖含量以大兴安岭和山西较高,甘肃和内蒙古次之;炮制品中总多糖含量以药材较高,饮片次之;不同部位总多糖含量以根较高,茎叶、花次之。采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,不同产地黄芪中总黄酮含量均较低,但差异不明显;炮制品中总黄酮含量以饮片较高,药材次之;不同部位总黄酮含量以花较高,茎叶、根次之。采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷含量,不同产地黄芪药材中总皂苷含量以内蒙古和山西较高,甘肃和大兴安岭次之;炮制品中总皂苷含量以药材较高,饮片次之;不同部位总皂苷含量以茎叶较高,花、根次之。(2)采用 HPLC法测定黄酮类成分含量,结果显示,不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮苷含量以大兴安岭和内蒙古较高、山西和甘肃次之,毛蕊异黄酮含量以大兴安岭和山西较高、甘肃和内蒙古次之,芒柄花素含量以甘肃和山西较高、大兴安岭和内蒙古次之,各产地黄芪药材中黄酮类成分含量均以毛蕊异黄酮苷含量最高:炮制品中的毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量均与药材含量较高,饮片次之。采用HPLC法建立黄酮特征图谱,不同产地黄芪药材黄酮特征图谱的相似度均较高,而炮制品黄酮特征图谱的相似度比较发现东北、河北相似度较高,但呼玛相似度较低。(3)依据药典方法测定黄芪药材中水分、灰分、浸出物的含量,测得水分含量为6.57%～8.11%、灰分含量为3.06%～4.15%、浸出物含量为21.71%～47.27%,均符合药典标准。(4)通过比较不同加工方法对黄芪质量的影响,发现黄芪经炒制后总多糖、总皂苷含量均较炒制前降低,总黄酮含量较炒制前增加:黄芪经蜜制后总多糖、总黄酮、总皂苷含量均较蜜制前降低,但黄芪经蜜制后总多糖含量较炒制损失更多。通过比较不同贮藏条件对黄芪质量的影响,发现置阴凉库和恒温恒湿箱中保存的饮片总多糖含量均降低,总黄酮、总皂苷含量均增加。(5)黄芪复合提取物最佳提取工艺为:100g饮片,10倍量70%乙醇提取2次,每次2h,提取液合并,浓缩至干,上D101大孔树脂柱,以4BV水、70%乙醇依次洗脱,收集70%乙醇洗脱液,减压干燥,即得。制备3批提取物,测定提取物中水分不超过5.0%,炽灼残渣不超过0.8%,总黄酮含量约17.0%,总皂苷含量约36.0%。结论:(1)本试验建立的多糖、黄酮、皂苷类成分的分析方法,经方法学验证,可以用于黄芪药材(根)、炮制品及地上部分(茎叶、花)的质量研究。(2)通过比较不同产地黄芪药材质量差异,发现不同产地黄芪药材总黄酮含量无明显差异,总多糖含量以大兴安岭和山西产黄芪较高,总皂苷含量以内蒙古产黄芪较高,毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮含量以大兴安岭产黄芪较高,芒柄花素含量以甘肃产黄芪较高。通过研究加工方法和贮藏条件对黄芪质量的影响,发现蜜制较炒制对黄芪质量影响更大,阴凉库和恒温恒湿箱两种贮藏条件对黄芪质量影响一致。(3)参照药典标准,增加总多糖、总黄酮、总皂苷三个测定指标,辅以黄酮特征图谱,可以比较黄芪质量差异。(4)本试验制得黄芪复合提取物总黄酮和总皂苷的含量合计高于50.0%。提取物质量标准对水分、炽灼残渣含量进行了限制。