论文部分内容阅读
植物根结线虫(Meloidogyne spp.)在世界范围内普遍发生,对农作物造成很大的损失,传统的化学防治带来了诸多副作用,所以,根结线虫的生物防治越来越受到国内外的重视,而食线虫菌物是线虫生物防治资源中最为重要的部分。本文对华南部分地区(海南,湖南,广东三省)的食线虫菌物进行了初步调查和研究,主要取得了以下研究结果:
1、本文从根结线虫病株分离样品165份,其中根围土壤样品136份,根结线虫的卵块和雌虫样品29份,共分离到食线虫菌物421株,鉴定菌株分属于19个属,22个种。包括节丛孢属(Arthrobotrys):葡萄串状节丛孢(A.arthrobotryoides)、葡萄孢节丛孢(A.botryospora)、环捕节丛孢(A.brochopaga)、圆锥节丛孢(A.conoides)、指状节丛孢(A.dactyloides)、弯孢节丛孢(A.musiformis)、少孢节丛孢(A.oligospora);曲霉属(Aspergillus):黑曲霉(A.niger);小克银汉霉属(Cunninghamella):绮丽小克银汉霉(C.elegans);隔指孢属(Dactylella):海南隔指孢(D.hainanensis);单顶孢属(Monacrosporium):囊孢单顶孢(M.cystosporium)、秀丽单顶孢(M.elegans)、椭圆单顶孢(M.ellipsosporum)、厚皮单顶孢(M.eudermatum)、中华单顶孢(M.sinense)、奇妙单顶孢(M.thaumasium);被孢霉属(Mortierella):高山被孢霉(M.alpma);串孢壶菌属(Myzocytium):胶串孢壶菌(M.glutinosporum);普可尼亚属(Pochonia):厚垣孢普可尼亚菌(p.chlamydosporia);拟青霉属(Paecilomyces):淡紫拟青霉(p.lilacinus);葡萄穗霉属(Stachybotrys):黑葡萄穗霉(S.chartarum);木霉属(Trichoderma):绿色木霉(T.viride);交链孢属(Alternaria spp.);弯孢属(Curvularia spp.);镰孢菌属(Fusarium spp.);钩丝孢属(Harposporium spp.);毛霉属(Mucor spp.);横隔霉属(Pleurophragmium spp.);青霉属(Penicillium spp.);枝霉属(Thamnidium spp.)。其中镰孢菌属(Fusarium spp.)真菌分离频率最高,占分离总菌株数的30.16%,其次是淡紫拟青霉(p.lilacinus),占8.55%。其中新记录种一种:胶串孢壶菌(M.glutinosporum);高山被孢霉(M.alpina)、黑葡萄穗霉(S.chartarum)在国内未见其在线虫生物防治方面的报道。
2、本文分别用单孢子与孢子悬浮液直接扩增的方法,研究了4种单顶孢:厚皮单顶孢(M.eudermatum)、中华单顶孢(M.sinense)、囊孢单顶孢(M.cystosporium)、奇妙单顶孢(M.thaumasium)rDNA ITS1-5.8S-ITS2区域的扩增效果。结果表明,两种扩增方法均可行,但以孢子悬浮液直接扩增的方法较为可靠。另外,通过对上述四种菌rDNA ITS1-5.8S-ITS2的序列比对分析表明,上述四种菌该区域相似度极高,不能从ITS序列将它们分开。
3、对淡紫拟青霉菌株进行了初步筛选,结果表明,不同的菌株在PDA平板上生长10d后的菌落直径有区别,而在麦粒培养基上培养12d后的产孢量有显著差异,但各菌株在PDA上的生长直径和在麦粒培养基上的产孢量没有相关性。另外,各菌株在第7d时对爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica)卵的平均寄生率为7.85%-37.61%。大多数供试的淡紫拟青霉菌株的发酵抽提液高温灭菌后对爪哇根结线虫二龄幼虫的杀线活性降低,而菌株QH2 Ⅰ的发酵抽提液对爪哇根结线虫二龄幼虫毒杀活性在高温灭菌前、后均为最高,分别是78.45%、83.88%,表现出良好的生防前景。