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目的：本文分析二亚硝基哌嗪(Dinitrosopiperazine, DNP)对鼻咽癌细胞热休克蛋白70-2 (Heat Shock Protein70-2,HSP70-2)表达的影响,探讨DNP参与鼻咽癌转移的分子机制。方法：1.选取来自同一母细胞的高转移潜能鼻咽癌5-8F细胞株和低转移潜能鼻咽癌6-10B细胞株作为研究材料,运用四甲基偶氮唑蓝(Methylthiazolyltertrazolium, MTT)实验分析DNP对6-10B细胞生长的影响,筛选出DNP对6-10B细胞的非毒性浓度(non-cytotoxic concentration, NCC)。2.采用非毒性浓度的DNP处理6-10B细胞,并以未处理的6-10B细胞、5-8F细胞作为对照,进行细胞生物学和分子生物学实验。3.采用细胞间接免疫荧光方法初步分析DNP对HSP70-2表达的影响,Western Blotting分析DNP诱导HSP70-2表达的量效关系。4.采用Real-time RT PCR技术检测DNP对HSP70-2基因表达的影响。5.利用SPSS18.0统计软件分析数据。结果：1.MTT实验分析DNP对鼻咽癌6-10B细胞生长的影响,结果表明DNP在高浓度(100μmol/L以上)时对鼻咽癌6-10B细胞生长增殖有明显的抑制作用(p<0.05),而在0～100μmol/L时对6-10B细胞的生长没有明显影响(p>0.05).0～100μmol/L为DNP对6-10B细胞的非毒性浓度。2.细胞间接免疫荧光实验观察DNP对鼻咽癌细胞HSP70-2表达的影响,结果显示DNP处理鼻咽癌6-10B细胞后,HSP70-2蛋白表达明显增强,细胞中的表达以胞浆为主,且DNP处理的6-10B细胞荧光强度同高转移潜能5-8F细胞一致。3.Western Blotting分析DNP诱导HSP70-2表达的量效关系,结果显示不同浓度(50μmol/L、100μmol/L)DNP处理的6-10B细胞,HSP70-2蛋白水平明显高于未处理6-10B细胞,且随DNP量增加而HSP70-2逐步增高(P<0.05)4.Real-time PCR分析DNP对Hsp70-2基因表达的影响,结果显示,未处理6-10B细胞中Hsp70-2基因相对折合表达量(1.04±0.33)与不同浓度(50μmol/L、100μmol/L)DNP处理的6-10B细胞中Hsp70-2基因相对折合表达量(分别为0.81±0.14、0.81±0.26)无明显差异(P>0.05),但5-8F细胞中的表达量(1.84±0.79)高于6-10B细胞。结论：1.DNP处理6-10B细胞后,细胞中的HSP70-2蛋白水平明显增高,表明DNP能上调HSP70-2蛋白水平。2.DNP处理6-10B细胞后,细胞中的Hsp70-2基因的相对折合表达量并不增高,DNP可能不是在基因水平调控HSP70-2,提示DNP可能通过转录后调控机制上调HSP70-2蛋白表达。3.5-8F细胞中的HSP70-2蛋白水平高于6-10B细胞,提示HSP70-2可能与细胞的恶性程度(转移潜能)有关。