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目的研究Notch和TGF-β信号通路在肝纤维化大鼠中的相互作用以及对Th17/Treg平衡的影响;探究常山酮干预肝纤维化大鼠,Notch和TGF-β通路的变化及其抗纤维化机制。方法Wistar雄性大鼠随机分为对照组(12只)、模型组(3组,每组12只)。刀豆蛋白A(ConA)建模,模型组大鼠每周尾静脉注射ConA 12.5mg/kg 1次,对照组大鼠每周尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)300μl 1次,连续8周;血清生化检测肝功能情况,HE染色观察肝组织病理变化。建模成功后模型组随机分成3组(DAPT组、TGF-β抑制组、DMSO对照组),每组12只,对其体外心尖无菌采血3 ml,分离外周单个核细胞(PBMCs),分别用Notch抑制剂DAPT及TGF-β抑制剂干预培养24 h,RT-PCR测Notch和TGF-β信号mRNA表达,Western Blot测Notch和TGF-β信号相关蛋白表达情况;流式细胞术检测Th17和Treg细胞频率,ELISA检测PBMCs培养上清细胞因子IL-17、IL-23、TGF-β及IL-10的表达水平;Wistar雄性大鼠随机分成模型组、常山酮组和正常组(每组12只),同上ConA建模,常山酮组自造模起灌胃常山酮(10mg/kg),模型组和正常组灌胃等量PBS,连续8周后RT-PCR测Notch和TGF-β信号m RNA表达,Western Blot测Notch和TGF-β信号蛋白表达情况,免疫组化观察肝脏Notch和TGF-β信号表达情况。结果与正常组相比,模型组大鼠的ALT及AST水平显著升高(P<0.05),ALB水平显著下降(P<0.05),HE染色显示肝细胞坏死伴假小叶形成;模型组Notch和TGF-β信号激活,其中Notch信号的Notch1、Hes1、Hes5和TGF-β信号的TGF-β1和Smad3 mRNA表达显著升高(P<0.05),相应的蛋白表达也明显上升(P<0.05)。与DMSO组相比,DAPT组Notch和TGF-β信号mRNA表达降低(P<0.05),蛋白表达也显著减低(P<0.05);TGF-β抑制组Notch和TGF-β信号相关mRNA表达降低(P<0.05),蛋白表达亦明显减低(P<0.05)。流式及ELISA法检测显示,与DMSO组相比,DAPT组和TGF-β抑制组中Th17细胞频率及其相关细胞因子(IL-17、IL-23)水平降低(P<0.05),Treg细胞频率及其相关细胞因子(TGF-β、IL-10)水平亦明显降低(P<0.05),Th17/Treg比值均较DMSO组上升。与模型组相比,常山酮组Notch和TGF-β信号Notch1,Hes1,Hes5及TGF-β1,Smad3 mRNA表达显著降低(P<0.05);相应蛋白表达也减低(P<0.05),与正常组相比无明显差异;免疫组化观察肝组织,常山酮组中Notch1,Hes1,Hes5及TGF-β,Smad3表达较模型组下降(P<0.05),与正常组无明显差异。结论Notch和TGF-β信号参与肝纤维化的发生发展,阻断Notch信号能抑制TGF-β信号,抑制TGF-β信号也可阻断Notch信号;Notch和TGF-β信号阻断后可抑制Treg细胞功能,降低TGF-β1水平,改变Th17/Treg细胞平衡;常山酮可抑制Notch和TGF-β信号通路,通过降低Smad3分子表达发挥抗大鼠肝纤维化作用。