脂肽类药物载体的构建及其载药性能的研究

来源 :中国石油大学(华东) | 被引量 : 0次 | 上传用户:my2002hhl
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多肽自组装是由小分子通过氢键作用,疏水相互作用,静电相互作用,范德华力,阳离子,-π吸附作用,π-π堆积作用等非共价相互作用在一定的条件下自发进行组装的行为。脂肽为脂质与氨基酸形成的化合物。其在拥有脂质疏水性和流动性的同时还拥有多肽自组装的特点。实验中,我们通过使用油酸分子与两个丝氨酸分子相连接构筑了一个两亲性的脂肽分子(OA-SS)。该分子在一定的浓度和p H下可在水溶液中自组装形成b-sheet的二级结构,进而组装形成宏观的薄膜结构。通过使用挤膜器推挤后,可使得组装体发生由薄膜到纳米囊泡的转变,但组装体的二级结构不会因此而发生变化。所得到的囊泡趋向于形成的粒径大小为300 nm左右,其它粒径下的囊泡可以使用低温的方法进行贮藏。随后,我们表征了囊泡组装体作为药物载体的可能性,当选用目标药物为盐酸阿霉素(DOX)时,组装体表现出良好的包封效果。在震荡透析实验中,与游离态的DOX释放相比,被囊泡包封后DOX释放速率明显变缓,表明该纳米囊泡对DOX药物具有良好的包封和缓释效果。随后,我们使用MTT法和细胞死活双染法对所用脂肽的细胞进行检测时发现,当在体外进行实验时,在一定的浓度下脂肽的对正常的人胚肾细胞(293E)并无明显细胞毒性。当选用人体宫颈瘤细胞(Hela)进行实验时,单独的脂肽溶液并不会对Hela细胞产生毒性。当使用一定浓度游离态的DOX溶液作用于Hela细胞时,Hela细胞的细胞相对存活率明显降低,且随着作用时间的延长,细胞的存活率逐渐降低。而在相同的药物浓度下,当DOX被囊泡包封后,在相同的作用时间下细胞的存活率明显升高。但随着作用时间的延长,由于药物的缓慢释放,细胞的存活率仍会逐渐降低。最后,我们制备了另一类载药量更大的药物载体---立方液晶相,探索了立方体液晶(Cubosomes)类药物载体的制备流程。我们首先使用传统的表面活性剂单油酸甘油酯(GMO)和稳定剂F127通过自上而下和自下而上两种途径进行了Cubosomes的制备并对所形成的组装体的形貌和粒径分布进行了检测。由于脂肽OA-SS同样具有一定的表面活性,故我们探索了使用β-酪蛋白作为稳定剂并加入油酸构筑油水界面的方法来进行组装体的制备,并表征了不同p H及浓度对组装体性质的影响。我们发现,该方法制备的立方液晶颗粒有比囊泡更好的稳定性,并且对药物的包封量更大。使用震荡透析的方法对游离态的DOX进行释放时,当DOX与形成的脂肽类Cubosomes混合时,由于DOX进入立方体的空隙,同样可以达到对DOX药物缓释的效果。同样在细胞实验中,我们发现单纯的立方液晶载体没有细胞毒性,而负载DOX的细胞载体与游离DOX相比,明显表现出了对Hela细胞的缓释毒性。
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