乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)改善小鼠溃疡性结肠炎机制的研究

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酪蛋白糖巨肽(CGMP)是一种具有可深度开发价值的乳源生物活性肽,许多生物活性已经得到了证实。CGMP除了良好的营养特性之外,还有如免疫调节、促进智力发育、抗微生物及毒素活性、促益生菌增殖活性以及可有效预防龋齿等活性。机体免疫自稳状态的紊乱会导致炎症性肠病等疾病的发生,溃疡性结肠炎(UC)是一种原因不明的慢性结肠炎性疾病,营养与饮食的调配是目前长期治疗该病的一个重要手段。本课题利用恶唑酮诱导建立溃疡性结肠炎小鼠模型,首先就乳源CGMP对小鼠溃疡性结肠炎的改善效果进行了初步研究,然后在对CGMP调节正常小鼠细胞因子IL-4和IFN-γ表达的研究结果的基础上,综合运用流式微珠阵列技术(CBA)和酶联免疫技术就CGMP对UC小鼠血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5、TNF-α、IL-1β和IL-10这7种细胞因子的影响进行了研究,同时利用免疫组化技术(IHC)检测了各组小鼠MUC2的表达情况,最后利用Western Blotting初步研究了CGMP对UC小鼠肠粘膜免疫信号通路(NF-κB和p38 MAPK)的影响,以探讨乳源CGMP改善小鼠溃疡性结肠炎的作用机制。结果:中剂量CGMP(50 mg/kg·d)可显著降低溃疡性结肠炎小鼠DAO活力、MPO活力及MDA含量,结肠病理组织形态的研究结果证实了CGMP可保持较完整的上皮细胞,从而有助于维持结肠组织形态的完整;CGMP对正常小鼠IL-4和IFN-γ的调节提示CGMP可能具有调节Th1/Th2的潜在功效;通过恶唑酮诱导建立溃疡性结肠炎模型小鼠的研究发现,CGMP可以有效抑制UC小鼠体内IL-1β、IL-5、IFN-γ和TNF-α的升高,同时促进了IL-10的分泌,CGMP对UC小鼠结肠组织中MUC2的表达也具有显著的促进效果;CGMP可以显著抑制抑制NF-κB的激活,CGMP虽然对p38 MAPK的抑制效果不显著,但仍具有抑制其激活的趋向。结论:CGMP具有显著的改善溃疡性结肠炎结肠组织氧化损伤的作用,其机制为CGMP可通过有效抑制溃疡性结肠炎小鼠体内NF-κB的激活并在一定程度上抑制MAPK的激活,下调UC小鼠体内IL-1β、IL-5、IFN-γ和TNF-α的异常表达,促进IL-10的分泌,同时可显著促进小鼠结肠黏膜MUC2的分泌来维系肠粘膜的屏障保护作用,从而减缓炎症程度。
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