人类对雌激素的不合理使用和向环境中的过度排放,使得水产品、畜产品等极易受到该类化合物污染,并通过食物链富集作用危害人类健康,引发疾病。蜂王浆作为一种营养丰富并具有一定保健功能的蜂产品,越来越受到消费者的青睐。已有研究表明,蜂王浆中含有雌激素,但是关于蜂王浆中雌激素种类与含量的色谱-质谱方面的分析方法鲜有报道。研究蜂王浆中雌激素活性物质的分析方法和含量水平,既可以为蜂产品风险评估体系提供有力支持,又为制定蜂产品质量安全标准提供重要技术依据。主要研究内容与结果如下：1.建立蜂王浆中10种雌激素活性化合物的HPLC-Q TOF MS分析方法研究,并对提取和色谱质谱实验条件进行优化。样品首先经酶解后用乙腈进行超声提取目标化合物。再经液液萃取并利用Oasis HLB小柱与Bond Elut-NH2小柱串接进行样品净化,洗脱并氮气吹干后用初始流动相进行复溶,过0.21μm滤膜,上HPLC-Q TOF MS分析。该分析方法呈现良好的线性相关性(10种雌激素的线性范围5-500μg/L,相关系数(R2)均大于0.995)。方法检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为2.4-5.0μg/kg和5.2-10.6μg/kg。回收率在64.5%-86.3%之间,RSD在1.8%-7.5%之间。实验证明,该方法定性、定量准确,分析快速,稳定等优点。可利用所建立并优化的分析方法对实际样品进行检测分析。2.建立同时分析蜂王浆中10种雌激素活性化合物的GC-MS分析方法研究,并对相应的实验条件进行了优化。样品预处理后,经衍生剂BSTFA/TMCS(99:1)在65℃1h条件下衍生化后,上GC-MS分析。实验结果表明,10种雌激素在5-500μg/L范围内线性关系较好,相关系数R2均大于0.996。方法检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为1.8-3.3μg/kg和5.3-7.4μg/kg。回收率在63.5%-75.5%之间,RSD在2.8%-9.5%之间。可利用所建立并优化的分析方法对实际样品进行检测分析,该方法与所建立的HPLC-Q TOF MS分析方法相比更适于一般型分析检测机构应用,有助于方法广泛推广。3.利用所建立的分析方法对国内蜂王浆中雌激素活性化合物的种类与含量进行初步调查。在所取的60个蜂王浆样品中,六种内源性雌激素,均未检出,另一方面,五个蜂王浆样品中检出环境雌激素BPA,其含量在5.8μg/kg-16.3μg/kg之间。并对阳性样品的产生原因进行了初步分析。个别蜂王浆样品BPA呈阳性可能由于人们在王浆生产和包装过程中所用塑料器具和包装材料不合格或者长期反复使用,导致BPA由塑料质地中溶出迁移至蜂王浆；另外,由于包装瓶等材料储存不当,如长期受到阳光直射等,可能使得BPA更易溶出污染蜂王浆。根据世界各国家和地区对于BPA的限量范围和相关规定,认为个别蜂王浆样品中含量在5.8μg/kg-16.3μg/kg范围内的BPA对人体是较为安全的。蜂王浆的较强雌激素作用有可能是某些植物甾醇,如2,4-亚甲基胆甾醇等所引起的,应在后续的工作中进行深入研究。