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目的:1、初步构建检测细胞因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β1及其受体单核苷酸多态性(SNPs)位点的寡核苷酸芯片,建立检测细胞因子及其受体基因多态性的方法学。2、初步建立细胞因子及受体基因多念性、细胞因子表达水平与移植肾急性排斥反应三者之间的关系。 方法:1、选取5种细胞因子及其受体单核苷酸多态性位点21个,设计寡核苷酸探针58条,进行多重PCR扩增、标记、杂交、激光扫描、信号分析、结果判断以及重复检测。2、利用基因芯片技术检测144例肾移植受者和103例相应供者外周血细胞中的细胞因子及其受体基因多态性,将供、受者分成急性排斥组和无排斥组,比较两组5种细胞因子和5种受体21个位点的基因型和等位基因分布情况。3、采用酶联免疫吸附测定(ABC-ELISA)方法测定65例汉族健康人和102例肾移植受者术前、术后第一天和第四天TNF-α、IL-10和TGF-β1血清浓度。 结果:1、30份肾移植受体样本用不同批号的基因芯片进行三次重复检测,结果完全相同,重复率100%。其余114例受体和103例供体样本基因芯片检测结果均满意。2、在肾移植受者中,以下细胞因子及受体基因型的出现频率与移植肾急性排斥反应率有统计学差异:TNF-α(-308A/A、A/G、G/G)、IL-10(-597A/A、C/C、A/C、-824T/T、C/C、C/T、-1087A/A、A/G)、TGF-β1(+869C/C、C/T、T/T);与移植肾急性排斥反应有关的细胞因子及受体等位基因为:TNF-α(-308A/G)、IL-10(-597A/C、-824T/C、-1087A/G)、TGF-β1(+869C/T)。3、在肾移植供者中,TNF-α(-238、-308)、TNF-αR(168、587)、IL-4(-590)、IL-4R(1902、Ile50Val)、IL-6(-597、-573、-174)、IL-6R(-183、D358)、IL-10(-597、-824、-1087)、IL-10R(536、1112)、TGF-β1(+869)和TGF-β1R(1167)的基因型及等位基因出现频率与移植肾急性排斥反应发生率无统计学差异。4、比较供、受者TNF-α、IL-10、TGF-β1细胞因子基因型不同组合与移植肾急性排斥反应的关系发现:受者TNF-α高分泌+供者高分泌基因型组合的急性排斥反应发生率(4/4,100%)比其它基因型组合组(44/140,31.43%)高;受者TNF-α低分泌+供者低分泌基因型组合的急性排斥反应发生率(16/77,19.67%)比所有其它基因型组合组32/67,47.76%)低,差别有统计学意义(P<0.011。受者IL-10高中分泌+供者高中分泌基因型组合的急性排斥反应发生率比所有其它基因型组合者低;受者低分泌+供者