葎草为桑科植物葎草Humulus scandens(Lour.)Merr的干燥地上部分,具有清热解毒,利尿通淋的功效,主治肺热咳嗽、肺痈、肺结核、虚热烦渴、热淋、水肿、小便不利、湿热泻痢、热毒疮疡、皮肤瘙痒等。本文在前期蓰草的质量标准及抗结核有效部位研究的基础上,对不同产地葎草进行了品质对比研究,并对不同生长期的葎草进行了有效成分动态变化研究,为完善和提高葎草质量标准及适宜采收期的选择提供了参考依据。主要研究内容及结果如下：1.首次进行了葎草不同生长时期干物质积累及有效成分的动态变化研究,并运用主成分分析法,对有效成分的动态变化进行了综合分析,为葎草适宜采收期的确定提供了参考依据。对两个不同产地、一个生长周期不同采收时间葎草的干物质积累及浸出物、总黄酮、木犀草素和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量进行动态测定,结果表明,不同产地干物质积累及浸出物、总黄酮、木犀草素和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量差异大,同一产地不同采收时间浸出物、总黄酮、木犀草素和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量有明显的区别,采用主成分分析法对有效成分的动态变化进行多指标综合分析,发现四川成都地区葎草主成分因子得分较高为2月,河北唐山地区葎草样品主成分因子得分较高者为8月,说明不同产地有效成分积累动态有差异,可能与这两个地区分属于南方、北方,地理位置、环境、气候等自然条件相差较大有关,提示其采收期的确定应考虑产地因素。2.首次对不同产地葎草进行了药材性状的对比研究,找出了其外观性状上的异同。通过对不同产地葎草外观性状的仔细观察,发现其性状特征有所不同,主要体现在颜色、叶表面的刚毛及腺点等方面：多数样品缠结成团,少数样品已切成段；颜色多为黄绿色,少为棕黄色或棕绿色；叶表面差别较明显,主要是上、下表面刚毛、腺点的密度有差异：带果实的样品,其果实的颜色及表面的斑纹有差异。3对不同产地葎草进行了木犀草素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的薄层色谱鉴别研究。3.1按照2010年版《四川省中药材标准》中规定的木犀草素薄层鉴别方法,对32批样品进行了木犀草素的薄层鉴别。结果显示,其中3号(浙江仙居)、4号(广东韶关)、7号(甘肃宕昌)、8号(江苏连云港)、11号(湖南长沙)、16号(四川宜宾)、21号(山东青岛)、23号(河北唐山)、24号(江西南昌)、25号(江西吉安)、28号(北京丰台区)、29号(重庆南川)、30号(上海崇明岛)、31号(安徽亳州药材市场)和32号(广西玉林药材市场)15个样品,在与木犀草素对照品相应的位置上,显相同颜色的黄绿色荧光斑点,但斑点的大小和荧光的强弱有所不同,其它样品未检出木犀草素,提示不同产地葎草在该成分的有无及量上有差异。3.2通过对样品前处理、展开系统、点样量、展距、展开湿度、展开温度及薄层板饱和时间等的考察,首次建立了芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的薄层鉴别方法。以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(8：6：3：1)为展开系统,分离效果较好,斑点多而清晰,Rf值适中。通过对32批不同产地及商品葎草进行薄层色谱实验,表明该方法对葎草芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的鉴别效果较好。32批供试品色谱中,1号(辽宁抚顺)、3号(浙江仙居)、4号(广东韶关)、5号(陕西咸阳)、7号(甘肃宕昌)、8号(江苏连云港)、11号(湖南长沙)、16号(四川宜宾)、20号(山东济南)、21号(山东青岛)、23号(河北唐山)、24号(江西南昌)、25号(江西吉安)、26号(福建福州)、28号(北京丰台区)、29号(重庆南川)和30号(上海崇明岛)17批样品,在与芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品相应的位置上,显相同颜色的黄绿色荧光斑点,但斑点的大小和荧光的强弱有所不同,其它样品未检出芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷,提示不同产地葎草在该成分的有无及量上有差异。4首次进行了葎草HPLC指纹图谱研究,建立了葎草的HPLC指纹图谱分析方法,并对不同产地葎草进行了聚类分析,为弄清不同产地葎草化学成分的差异性提供了参考依据。4.1通过对色谱条件的筛选、梯度洗脱方式的考察、供试品溶液制备的考察以及精密度、稳定性、重复性的方法学验证,建立了葎草乙酸乙酯部位的指纹图谱。通过对32批葎草样品HPLC指纹图谱的分析,确定了15个共有峰。4.2对葎草乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱进行相似度分析,结果表明,不同产地葎草药材指纹图谱相似度较低。进行聚类分析,结果表明,以距离15划分,可聚为两类,相似度在0.7以上的样品,包括5号(陕西咸阳)、6号(山西运城)、7号(甘肃宕昌)、9号(贵州安顺)、10号(贵州贵阳)、13号(成都温江区)、14号(成都锦江区)、15号(四川西昌)、18号(四川彭州)、19号(四川遂宁),可聚为一类,其余样品聚为一类；以距离10划分,可聚为3类,相似度在0.7以上的样品,聚为一类,0.3-0.7之间的样品,包括2号(河南南阳)、4号(广东韶关)、11号(湖南长沙)、12号(广西河池)、16号(四川宜宾)、17号(四川绵阳)、3号(浙江仙居)、24号(江西南昌)、25号(江西吉安)、26号(福建福州)、27号(福建漳州)、32号(广西玉林药材市场),可聚为一类,其余样品聚为一类。5对32批不同产地葎草样品进行了水分、总灰分及酸不溶性灰分的检查和浸出物的测定。5.1按照2010年版《四川省中药材标准》中规定的方法,对32批不同产地葎草样品进行水分测定。所测32批不同产地的葎草样品水分含量最高为9.7%,最低为4.9%。参照2010年版《四川省中药材标准》中水分不得过10.0%的规定,32批样品均符合标准规定。5.2按照2010年版《四川省中药材标准》中规定的方法,对32批不同产地葎草样品进行总灰分及酸不溶性灰分的测定。所测32批样品总灰分最高为19.83%,最低为10.43%；酸不溶性灰分最高为4.56%,最低为0.30%。参照2010年版《四川省中药材标准》,总灰分不得过19.0%,酸不溶性灰分不得过5.0%的规定,除24号(江西南昌)样品总灰分不符合标准外,其余均符合标准规定。5.3按照2010年版《四川省中药材标准》中规定的方法,对32批不同产地葎草样品进行浸出物的测定。结果表明,32批不同产地葎草样品的浸出物含量最高为21.88%,最低为8.73%。参照2010年版《四川省中药材标准》中葎草浸出物含量不得少于12.0%的规定,22号(重庆沙坪坝)、30号(上海崇明岛)31号(安徽毫州药材市场)、32号(广西玉林药材市场)样品不符合标准规定。6首次建立了葎草总黄酮的紫外分光光度法测定方法、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的HPLC含量测定方法,并对32批不同产地葎草样品进行了总黄酮、木犀草素及芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定,为完善葎草质量评价标准及对比分析不同产地葎草质量差异提供参考依据。6.1对葎草进行了紫外-分光光度法测定总黄酮含量的实验研究。通过对供试品溶液制备、精密度、稳定性、重现性、加样回收等的方法学考察,建立了以木犀草素为对照品的葎草总黄酮的紫外-分光光度法测定方法。运用该方法对不同产地样品进行总黄酮含量的测定,结果表明,不同产地葎草样品的总黄酮含量差异较大,3号(浙江仙居)、4号(广东韶关)、5号(陕西咸阳)、12号(广西河池)、16号(四川宜宾)、19号(四川遂宁)、26号(福建福州)和28号(北京丰台区)8个样品含量较高,22号(重庆沙坪坝)、24号(江西南昌)、30号(上海崇明岛)、31号(安徽毫州药材市场)、32号(广西玉林药材市场)5个样品含量相对较低。6.2按照前期建立的木犀草素HPLC含量测定方法,对不同产地葎草样品进行了木犀草素的含量测定。结果表明,4号(广东韶关)、8号(江苏连云港)、16号(四川宜宾)、23号(河北唐山)、28号(北京丰台区)5个样品中木犀草素含量较高；2号(河南南阳)、6号(山西运城)、10号(贵州贵阳)、12号(广西河池)、13号(成都温江区)、14号(成都锦江区)、15号(四川西昌)、18号(四川彭州)、22号(重庆沙坪坝)和27号(福建漳州)10个样品中未测出木犀草素含量。此结果与薄层色谱鉴别结果基本一致。6.3对葎草进行了HPLC芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量测定的实验研究。通过进行测定波长及色谱条件的选择、供试品溶液的制备方法的考察,以及精密度、稳定性、重现性、加样回收试验的方法学验证,建立了葎草芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的HPLC测定方法。运用该方法对不同产地样品进行芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量的测定,结果表明,1号(辽宁抚顺)、3号(浙江仙居)8号(江苏连云港)、11号(湖南长沙)、16号(四川宜宾)、21号(山东济南)、23号(河北唐山)、28号(北京丰台区)和29号(重庆南川)9个样品中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量较高；2号(河南南阳)、10号(贵州贵阳)、13号(成都温江区)、15号(四川西昌)、18号(四川彭州)和22号(重庆沙坪坝)6个样品中未测出芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量。此结果与薄层色谱鉴别结果基本一致。