目的目前,血小板源性生长因子-D(Platelet-derived growth factor-D,PDGF-D)在创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)中的作用及其机制还未有人报道。本课题,我们构建了大鼠TBI模型,以期研究PDGF-D在大鼠TBI模型中的动态表达情况,并进一步研究PDGF-D在TBI后继发性脑损伤中的作用及其机制,为寻找TBI后的治疗靶点以及干预时间选择提供一定的理论指导。方法(1)通过构建大鼠TBI模型,评估PDGF-D在大鼠TBI中的动态表达及其功能。(2)利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠脑组织中PDGF-D、p-PDGFR-β、p-p65、NF-κB p65的蛋白表达水平。(3)利用组织免疫荧光技术(IF)检测PDGF-D和p-PDGFR-β在脑血管中的表达。(4)利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测脑组织中的PDGF-D表达情况。(5)采用Garcia实验评价下调PDGF-D对TBI大鼠神经功能的影响。(6)通过检测脑含水量评价下调PDGF-D对TBI大鼠脑水肿的影响。(7)酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织中炎症因子的表达水平。结果(1)通过 Western blot 检测到 PDGF-D 和 p-PDGFR-β 在 TBI 后高表达,TBI 后 6h-3d中PDGF-D的表达明显高于假伤组(Sham组)(p<0.05)。TBI后12h、24h、3d中p-PDGFR-β的表达明显高于Sham组(p<0.05)。(2)免疫荧光检测到TBI处理24小时后病灶区脑血管中存在PDGF-D与p-PDGFR-β 的表达。(3)下调PDGF-D可改善TBI后大鼠的神经功能,并减轻脑水肿。(4)通过ELISA检测发现,下调PDGF-D可抑制TBI后炎症因子的表达。(5)利用Western blot检测发现,下调PDGF-D可抑制TBI大鼠中p-PDGFR-β的表达以及NF-κB信号通路的活化。结论本研究揭示了大鼠TBI后PDGF-D和p-PDGFR-β的动态表达情况,提示PDGF-D和p-PDGFR-β在TBI过程中会发生高表达。并且研究发现,下调PDGF-D可改善TBI后大鼠的神经功能、减轻脑水肿以及抑制炎症因子的表达。进一步机制研究发现,下调PDGF-D可抑制TBI大鼠中p-PDGFR-β的表达以及NF-κB信号通路的活化。以上这些结果提示,PDGF-D可能通过激活其受体PDGFR-β来调控NF-κB信号通路的活化,进而影响炎症因子的表达,从而参与TBI后继发性脑损伤过程,为寻找TBI后的治疗靶点以及干预时间选择提供一定的理论基础。