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目的疼痛是组织损伤所引起的一种不愉快的主观感觉和情绪体验。长期慢性疼痛的病人通常伴有抑郁、易怒、兴趣缺失、动机行为下降等情感障碍。然而,临床上缺乏既能有效的治疗神经病理性疼痛又能缓解情感障碍的药物,因此开发新的且有效的治疗疼痛的药物十分迫切。中脑边缘奖赏系统中伏核(nucleus accumbens,NAc)的功能异常在急性疼痛慢性化以及伴随慢性疼痛而发生的动机行为下降中具有重要的作用。在外周以及脊髓背角,单核细胞趋化因子CCL2通过作用其受体CCR2参与炎性痛及神经病理性疼痛的发生。然而,神经损伤后伏核区CCL2及受体CCR2是否发生表达变化以及它们在神经病理性疼痛和伴随的抑郁情绪中的作用并不清楚。本论文主要对小鼠伏核区CCL2及其受体CCR2参与慢性疼痛及抑郁样行为的机制进行了研究。方法成年ICR小鼠(8-12weeks),采用L5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)的方法建立神经病理性疼痛模型。实时定量PCR检测不同时间点CCL2/CCR2mRNA的表达;Western Blot法检测SNL模型后CCR2、p-NR2B、NR2B、p-ERK、ERK蛋白表达的变化;免疫荧光双标的方法确定CCL2/NeuN、CCL2/GFAP、CCL2/IBA-1、CCR2/p-NR2B、CCR2/GFAP、CCR2/IBA-1、D1R/CCR2、D2R/CCR2、D1/NeuN、D2/NeuN、D1/p-ERK、D2/p-ERK的表达分布和表达类型。行为学检测机械性触诱痛、热痛觉过敏、糖水偏好以及强迫游泳等行为表现,并观察伏核区局部注射CCR2干扰慢病毒(CCR2 shRNA)、CCL2过表达慢病毒、NR2B拮抗剂Ro 25-6981、ERK拮抗剂PD98059对相关行为的影响。结果(1)实时定量PCR和Western检测结果显示,在SNL模型损伤诱导的神经病理性疼痛模型中,伏核区趋化因子CCL2和其受体CCR2的mRNA和蛋白表达升高。免疫荧光检测结果显示CCL2和CCR2均主要与神经元标记物NeuN共标,而且在多巴胺D1受体和D2受体阳性细胞都有表达。(2)行为学检测结果表明,SNL诱导的神经病理性疼痛模型不但能引起机械性触诱发痛和热痛觉过敏,而且在强迫游泳实验中,小鼠的静止时间会显著增加;在糖水偏好实验中,小鼠对糖水的偏好度明显降低。小鼠伏核区注射CCR2 shRNA干扰慢病毒可缓解SNL模型损伤诱导的机械性触诱发痛和热痛觉过敏,并减少强迫游泳的静止时间以及提高小鼠对糖水需求量的行为表现;正常小鼠伏核区注射CCL2过表达慢病毒可诱导小鼠出现痛觉过敏行为、增加强迫游泳静止时间并降低小鼠糖水偏好的发生;(3)SNL诱导伏核区p-NR2B蛋白含量显著增高。小鼠伏核区注射CCR2干扰病毒可抑制SNL模型引起的p-NR2B蛋白的增加;正常小鼠伏核区注射CCL2过表达病毒可诱导p-NR2B蛋白的增加;免疫荧光结果显示p-NR2B和CCR2共标。(4)小鼠伏核区注射NR2B拮抗剂Ro25-6981可缓解SNL模型损伤诱导的痛觉过敏及抑郁样行为。(5)SNL模型后ERK磷酸化水平升高,且p-ERK与多巴胺D1受体和D2受体都有共标;正常小鼠伏核区注射CCL2过表达病毒可诱导ERK磷酸化水平升高增加;ICR小鼠伏核区注射CCR2干扰病毒可抑制SNL模型引起的ERK磷酸化水平以及p-NR2B蛋白水平的升高。ERK抑制剂PD98059可缓解SNL模型损伤诱导的痛觉过敏及抑郁样行为。结论在SNL模型诱导的神经病理性疼痛模型中,伏核区(NAc)趋化因子CCL2及其受体CCR2表达增加。CCL2/CCR2通过作用于ERK调节伏核区内NR2B的磷酸化水平,并改变神经元突触后NMDA受体功能,参与小鼠神经病理性疼痛以及抑郁样行为的维持。