【摘 要】
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目的构建FAK RNAi慢病毒载体,探讨其对胃癌细胞增殖活性、侵袭及转移能力影响,为胃癌新的基因疗法提供依据。研究方法1.构建FAK RNAi慢病毒载体,通过绿色荧光蛋白报告基因GFP
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目的构建FAK RNAi慢病毒载体,探讨其对胃癌细胞增殖活性、侵袭及转移能力影响,为胃癌新的基因疗法提供依据。研究方法1.构建FAK RNAi慢病毒载体,通过绿色荧光蛋白报告基因GFP检测转基因效率。2.重组慢病毒感染胃癌细胞SGC7901,MTT法检测FAK沉默对SGC7901细胞增殖的影响,并通过Western blot法检测FAK干扰前后SGC7901细胞中FAK表达的变化。3.制备Transwell小室,检测FAK沉默对SGC7901细胞侵袭及转移能力的影响。结果1.成功构建了靶向FAK的RNAi慢病毒载体,其对胃癌细胞SGC7901细胞具有稳定感染能力。2.MTT检测并绘制细胞生长曲线,可见干扰组胃癌SGC7901与未处理组及阴性对照组相比,生长明显抑制(P<0.05),未处理组及阴性对照组无明显差别(P>0.05)。Western blot方法检测FAK蛋白水平表达发现,干扰组胃癌SGC7901细胞较未处理组及阴性质粒对照组,FAK的表达均明显降低。3.体外侵袭与转移实验:对比未处理组及阴性对照组细胞,干扰组细胞侵袭及转移能力明显下降(P<0.05),正常组及阴性对照组细胞之间无明显差别(P>0.05)。结论1.成功构建FAK的RNAi慢病毒载体。2.重组慢病毒载体有效抑制感染胃癌SGC7901细胞增殖活性。3.FAK沉默明显抑制胃癌SGC7901细胞侵袭及转移能力。
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