鸡p15~(INK4B)基因的克隆表达及其作用的研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhh760606
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鸡马立克氏病是由马立克氏病毒引起的一种淋巴肿瘤病。近年来,毒力日渐增强的鸡马立克氏病毒,每年给养鸡业造成巨大损失,世界各国已从各种角度开展马立克氏病的研究工作。已有的研究认为,肿瘤实际上就是一种细胞周期病,所以细胞周期调控网络已是各种肿瘤的防治研究的重点。在哺乳动物细胞中,p15INK4B和p16INK4A同属细胞周期抑制因子INK4家族,是pRB-INK4细胞周期调控通路的重要的两个因子之一,因能抑制肿瘤细胞的增殖,而被称为肿瘤抑制因子。但最近的研究发现,在鸡细胞内只有p15INK4B而无p16INK4A,所以在鸡细胞内p15INK4B可能发挥着更重要的作用。为此,拟从p15INK4B因子入手,以鸡马立克氏肿瘤细胞系为模型,开展鸡细胞周期调控研究,为深入理解细胞的增殖、衰老、凋亡机制,尤其是为鸡马立克氏肿瘤病的研究提供理论依据。首先构建了p15INK4B基因的原核表达载体,在原核细胞内表达并纯化p15INK4B蛋白,并用此蛋白免疫BALB/c小鼠,成功制备了p15INK4B蛋白的单克隆抗体。继而构建了p15INK4B基因的真核表达载体并将其转染入鸡的马立克氏肿瘤细胞系MDCC-MSB1。结果显示,p15INK4B在MDCC-MSB1中正确表达,并抑制了细胞增殖,同时也抑制了端粒酶的活性。根据这些实验结果,作者欲对p15INK4B蛋白的特性进行深入研究,为此还构建了p15INK4B的杆状病毒-昆虫细胞表达载体系统,经条件优化,成功地表达了p15INK4B蛋白。总之,本研究首次对鸡p15INK4B蛋白的生物学功能进行了初步的探讨,制备了其单克隆抗体,并在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中进行了表达,这些都为进一步研究p15INK4B因子及鸡细胞周期的调控机制奠定了基础。
其他文献
本文以长江日报报业集团"长江严选"电商平台为例,对疫情危机下传统媒体介入新经济探析。
语文陪伴着每一个中国学生从小学到大学,语文教学不同于其他学科的教学,因为语文能力的强弱主要取决于学生平时的日常积累,因此语文教学中更着重于对学生思维能力以及学习兴
分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位.在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(ChineseHamster Ovar
目的:将自由饮食摄入与计划性饮食能量摄入用于产程分娩中,分析其对分娩结局的影响。方法:选取2018年1月至2019年3月接收的106例产妇,随机分为观察组与对照组,各53例,对照组
当下医院大多利用互联网技术将医院的全部物品数据进行了电子登记、整理,为医院的会计管理工作减轻了一定的负担.但影响医院会计管理工作水平的因素较多,如何有效应对风险成
要充实农村、发展农业,必须重建农民对土地的信心,让农民从土地里刨出比打工更高的收入$$ 我亲历过曾经席卷农村的饥馑和贫穷,也见证着农业发展的铿锵足迹。全面小康,农民是难
报纸
<正>临床用于治疗疼痛的药物包括:一、麻醉性镇痛药;二、解热镇痛药;三、抗神经痛药;四、抗偏头痛药;五、解痉止痛药。麻醉性镇痛药麻醉性镇痛药又称为阿片类镇痛药,是最常见
肥皂是常见的生活用品,它除了能清洗衣物,美化我们的生活,在物理实验中,也扮演着多重角色,现举例如下。
目的研究硅酮凝胶对小型猪瘢痕模型中血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨医用硅酮凝胶的作用机制。方法于2015年7-9月构建小型猪猪背瘢痕模型,随机分为空白对照组和硅酮凝胶组