金属卟啉的光谱特性及其与DNA相互作用的研究

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第一章:简要阐述了DNA与小分子探针的主要作用模式,综述了卟啉类探针与DNA作用的研究方法。 第二章:以meso-四(对-甲基吡啶基)卟啉(H2TMPyP)和Pd(NO3)2为原料,合成了水溶性钯卟啉的配合物(Pd(Ⅱ)TMPyP),考察了Pd(Ⅱ)TMPyP的紫外可见吸收、荧光和固体基质室温磷光等光谱特性。对影响Pd(Ⅱ)TMPyP磷光强度的各种因素,包括滤纸基质类型、无机盐、点样时机和稳定性等进行了详细研究,发现Pd(Ⅱ)TMPyP的荧光和磷光发射均处于长波长区。在85℃下设定预烘烤时间和烘烤时间分别为60秒,以慢速定量滤纸为固体基质,外加无机盐Ca(NO3)2,Pd(Ⅱ)TMPyP能产生强的室温磷光信号。 第三章:采用固体基质室温磷光光谱、荧光光谱以及紫外可见吸收光谱法研究了钯卟啉(Pd(Ⅱ)TMPyP)与ctDNA的相互作用。实验表明:ctDNA使Pd(Ⅱ)TMPyP的固体基质室温磷光强度增强,磷光寿命增长,荧光偏振值增加,并使阴离子对Pd(Ⅱ)TMPyP的磷光猝灭程度减小,这说明Pd(Ⅱ)TMPyP与ctDNA发生了嵌插键合。同时,Pd(Ⅱ)TMPyP的吸收光谱在ctDNA存在下,其最大吸收发生明显红移(≥15nm)和减色(≥35%)效应也证明Pd(Ⅱ)TMPyP与ctDNA发生嵌插作用。 第四章:研究了不同浓度ctDNA对镍卟啉(Ni(Ⅱ)TMPyP)的光谱影响。结果表明:在ctDNA浓度较低时,Ni(Ⅱ)TMPyP与ctDNA仅发生简单的外部结合;当高浓度ctDNA存在时,Ni(Ⅱ)TMPyP的荧光强度增强,荧光峰蓝移,而激发峰红移,同时荧光偏振值增大,阴离子对Ni(Ⅱ)TMPyP的荧光猝灭减小,这些结果表明Ni(Ⅱ)TMPyP可能与高浓度的ctDNA发生嵌插作用,紫外吸收光谱的明显变化也证明可能是嵌插作用。用McGhee-vonHippel方程求得结合常数为4.03×105L/mol。 第五章:使用荧光光谱、紫外可见吸收光谱和共振光散射光谱研究了铜卟啉(Cu(Ⅱ)TMPyP)和钴卟啉(Co(Ⅱ)TMPyP)与ctDNA的作用模式。Cu(Ⅱ)TMPyP体系中加入ctDNA,其最大吸收有明显的减色和红移现象,同时荧光强度明显增强,荧光偏振值增大,Cu(Ⅱ)TMPyP受阴离子的猝灭程度降低,这证明作用方式可能为嵌捅作用;而Co(Ⅱ)TMPyP的荧光和紫外光谱在加入ctDNA后没有明显变化,但ctDNA可使Co(Ⅱ)TMPyP的散射信号明显增强,表明Co(Ⅱ)TMPyP可能在DNA表面堆积。McGhee-vonHippel方程求得Cu(Ⅱ)TMPyP和Co(Ⅱ)TMPyP与ctDNA的结合常数分别为:4.29×105L/mol和3.65×105L/mol,说明Cu(Ⅱ)TMPy和Co(Ⅱ)TMPyP都与ctDNA有较强的结合能力。
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