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本研究以桐乡青冬芽叶片、沙二×伦109种子子叶和25个桑品种冬芽为材料，比较了不同处理条件下的植株再生和愈伤组织诱导的差异，获得再生植株，建立了离体再生体系，并对桑离体培养过程中内源激素、SOD和POD变化与形态发生的相关性进行了探讨，为有效地调控桑离体形态发生和遗传转化奠定基础。主要的工作和结果如下： 1．离体再生体系的建立 1．1外植体对桑离体培养的影响 在MS+NAA0．5 mg／L+BA0．5 mg／L培养基上，25个材料的试管苗得率为0～87％，表现出较大的差异；桑枝条基部的培养效果较好。1月份采样的冬芽试管苗得率高于12月和2月采样的冬芽。 1．2愈伤组织和不定芽诱导 正交试验表明，在MS+BA0．5mg／L+NAA0．5mg／L，附加30％果糖，8p维生素，500mg／L酪蛋白水解物，叶片愈伤组织诱导率达68％，叶片不同部位的愈伤组织诱导率差异较大。在MS+BA3．0mg／L+IAA0．3 mg／L的培养基上，子叶不定芽诱导率为71．6％，附加0．5mg／L的硝酸银能提高子叶不定芽诱导率(75％)，并降低褐化率。 1．3试管苗增殖和生根 在MS+BA3．0 mg／L+IAA0．5mg／L的培养基上培养10天，试管苗获得较大的增殖系数(4．67)。1／4MS+IBA0．5，附加浓度300～600mg／L的肌醇是桑试管苗生根的较适培养基，2000Lx的光照强度有利于桑试管苗生根。 2．生理生化研究 2．1内源激素变化 桑子叶内源激素的浓度随培养时间而改变，ABA随培养时间的增加而增加，在培养16天时有一个高峰；iPA、ZR、DHZR在培养的第8天有一个峰值，此后下降；IAA在培养的第6天和第16天各有一个峰值。 2．2SOD和POD分析 在离体培养过程中桑SOD和POD同工酶和酶活性成一定的规律性变化。SOD同工酶的谱带表现上，在不定芽的发生时，一些谱带消失，不定根发生时，出现二条新的同工酶谱带；POD同工酶谱带在不定芽发生时，一条同工酶带消失，POD和SOD在培养8天和16天各出现两个活性峰。 2．3硝酸银对离体生理变化的影响 添加一定浓度的硝酸银能够降低ABA、IAA、iPA的浓度，提高细胞分裂素和生长素的比值，促进芽的分化而抑制根的发生；外植体的SOD和POD同工酶谱带也有变化，同时提高芽分化时两种酶的活性，降低根原基发生时SOD和POD的活性