藏系绵羊又称为藏羊,是我国三大原始绵羊品种之一,主要分布在高寒牧区,青海是主要产区。藏系绵羊被毛纤维粗长,毛质细腻且保暖性好,是制造床毯、地毯等的良好原料。羊毛的生长本身就是各种生长因子或激素相互作用,共同促进毛囊生长的结果,本研究以IGF-Ⅰ、VEGF和HGF三种基因为研究对象,从自然放牧的藏系绵羊所产1月龄羔羊皮肤样本中提取了总mRNA,依据GenBank中普通绵羊的基因序列,设计特异性引物,分别扩增了表达IGF-Ⅰ、VEGF和HGF三种生长因子的功能基因,并对所扩增出的基因进行了克隆和序列分析;另外,还采用实时荧光定量PCR技术SYBR Green I荧光染料法,对妊娠后期藏系绵羊进行营养补饲后,就其所产羔羊体内的IGF-I、VEGF和HGF基因mRNA的表达水平进行了相对定量分析。本研究取得了如下结果:1.成功克隆出了藏系绵羊VEGF基因全长CDS共573bp、IGF-ⅠcDNA序列共940bp和HGF基因cDNA的部分序列,长度为108bp。经序列比对后发现,所研究的这三个基因与普通绵羊、山羊、牛、马、猪、人、鸡、鸭、大鼠和小鼠等物种之间具有高度同源性,其相似性在100%至74.2%之间,其中藏系绵羊与普通绵羊的这三个基因的同源性最高,相似性为100%。2.建立了快速检测IGF-I、VEGF和HGF基因表达量的方法,通过该方法的检测结果表明:给妊娠后期藏系母羊补饲营养舔砖后,所产羔羊体内IGF-Ⅰ、VEGF和HGF基因的表达水平均比对照组高,分别为对照组的1.1倍、11.5倍和76.1倍;给妊娠后期藏系母羊补饲颗粒饲料后,所产羔羊体内IGF-Ⅰ、VEGF和HGF基因的表达水平分别为对照组的1.8倍、0.85倍和1.9倍。3.本研究的结果显示,所建立的IGF-I、VEGF和HGF三种生长因子基因的real-time PCR具有良好的扩增效率、线性范围和稳定性。